細菌的動力試驗是怎麼做的,細菌的動力試驗是怎麼做的可以詳細點謝謝

2021-03-03 20:48:07 字數 2590 閱讀 2980

1樓:歐陽俠

首先需要配置好半固體培養基(半固體培養基相對於固體培養基,瓊脂含量少而顯得稀薄,利於有動力的細菌生長擴散)。

接種時,使用接種針挑取少許待檢細菌,豎直做一個穿刺,但不要插到試管底部。培養後,如果動力為陽性,則可以看到穿刺線模糊,有明顯的擴散生長痕跡。如果動力陰性,則穿刺線明顯。

細菌的動力試驗是怎麼做的 可以詳細點 謝謝

2樓:歐陽俠

如果只做動力,使用半固體瓊脂即可,每個小試管2.5ml,高壓滅菌冷卻後即可使用。

用接種針挑取你所要檢測的細菌,然後垂直從半固體瓊脂表面插下去,插到離小試管底部只有5mm左右時再垂直抽回來,即做一條穿刺線,這樣就完成了接種。

放在37度培養箱中培養18-24小時可觀察結果(部分細菌培養溫度不同,由細菌的性質決定),如果穿刺線清晰,未擴散,則表明動力陰性。如果穿刺線模糊,側光看可明顯觀察到穿刺線周圍有擴散生長的痕跡,則為陽性。

那種培養基可以用來作動力試驗。 20

3樓:歐陽俠

動力實驗使用的是半固體瓊脂培養基。

這種培養基因為含瓊脂量比較少,使用待測菌進行穿刺接種之後進行培養,如果有動力,那麼細菌就可以在這樣的瓊脂內進行穿行,從而造成穿刺線模糊,可以觀察到細菌沿穿刺線周圍擴散生長。

求細菌穿刺實驗詳細過程

4樓:萌芽

目的要求

1.掌握膿液及穿刺液的標本採集方法。

2.掌握膿液及穿刺液標本的細菌學檢驗程式和方法。

器材和試劑

1.標本 穿刺液、膿液或創面分泌物或模擬標本。

2.培養基 血平板、厭氧培養瓶;o-f試驗管、kia、miu、硝酸鹽還原、檸檬酸鹽等常用生化反應管。

3.試劑 革蘭染色液、3%過氧化氫、1%鹽酸四甲基對苯二胺、吲哚試劑、新鮮血漿。

4.其他載玻片、顯微鏡。

步驟和方法

1.標本採集

(1)腹水:由臨床醫師無菌採集胸腔或腹腔積液5~10ml,置無菌試管中送檢。

(2)封閉性膿腫:在病灶區域性外表,消毒後,用無菌方法穿刺抽取膿液5~10ml,置無菌試管中送檢。懷疑為厭氧菌感染時,抽取膿液後立即排盡注射器內空氣,將膿液注入厭氧運送小瓶中送檢。

(3)開放性膿腫:先消毒病灶周圍,清理病灶表面,然後用無菌棉籤採取病灶深部膿液及分泌物,置無菌試管中送檢。

(4)大面積燒傷的創面分泌物:燒傷的部位和創面不同,細菌的種類也不同。故應在多部位用無菌棉籤採集標本,放人無菌試管中,註明部位後送檢。

(5)瘻管:可用無菌操作採取部分壞死組織,或用無菌棉籤擠壓瘻管,選取有特徵性的如「硫磺顆粒」送檢,也可將滅菌紗布條塞入瘻管中,次日取出送檢。

2.檢驗程式見圖5—8。

3.常見致病菌的檢驗及報告方式

(1)肉眼觀察:觀察標本的性狀、顏色及有無放線菌顆粒。標本呈綠色,可能是銅綠假單胞菌感染;有惡臭的標本可能是厭氧菌或變形桿菌感染;膿液中有「硫磺顆粒」,提示放線菌感染。

(2)塗片檢查:將標本直接塗片,用革蘭染色後鏡檢,根據鏡下細菌的形態和染色特點,可報告「直接塗片找到革蘭×性x菌」。

(3)需氧菌培養:通常選用血平板和emb平板做劃線分離,35℃孵育18~24h。觀察菌落形態,塗片染色觀察。

根據菌落形態,塗片染色的結果,初步判斷細菌的種類,再按各類細菌的鑑定要點進行鑑定。

1)金黃色葡萄球菌:血平板上中等大小、突起、溼潤的圓形菌落,有β溶血環,金黃色或白色菌落。塗片染色鏡檢為革蘭陽性、葡萄狀排列球菌;觸酶陽性,發酵甘露醇,血漿凝固酶陽性,新生黴素敏感,耐熱核酸酶陽性。

可報告「檢出金黃色葡萄球菌」。

2)銅綠假單胞菌:在血平板上,菌落扁平、邊緣不整齊、溼潤、向四周擴散、培養基上常有水溶性的藍綠色色素,有β一溶血環和特殊氣味。革蘭染色為革蘭陰性的直杆菌,兩端鈍圓。

氧化酶陽性、氧化葡萄糖和木糖產酸不產氣,還原硝酸鹽為亞硝酸鹽或產生氮氣。利用檸檬酸鹽、精氨酸雙水解酶陽性。42℃生長。

符合以上鑑定要求的可報告「檢出銅綠假單胞菌」。

3)變形桿菌:在血平板上,菌落扁平呈遷徙性瀰漫生長,溼潤、灰白色。由於細菌蛋白酶的作用,可見有類似溶血的現象,有惡臭。

革蘭染色為革蘭陰性桿菌,多形性;氧化酶陰性、觸酶陽性、苯丙氨酸脫氨酶陽性、kia:k/a、h2s:+、產氣;miu:

動力(+)、靛基質 (+)、脲酶(+)。符合以上要求可報告「檢出普通變形桿菌」。

(4)膿液及穿刺液標本常見的病原菌。見表5—12。

表5-12膿液及穿刺液標本常見的病原菌

革蘭陽性細菌 革蘭陰性細菌

球菌 金黃色葡萄球菌、化膿性鏈球菌 腸球菌

桿菌 結核分枝桿菌、炭疽芽胞桿菌 產氣莢膜梭菌、破傷風梭菌 潰瘍棒狀桿菌 變形桿菌、大腸埃希菌 肺炎克雷伯菌、銅綠假單胞菌 腐敗假單胞菌

其他 放線菌、奴卡菌、念珠菌 陰溝腸桿菌 枸櫞酸桿菌 糞產鹼桿菌

注意事項

1.膿液及穿刺液標本的性狀觀察和直接塗片,極其重要。可以指導進一步的檢驗方向。

2.直接塗片有細菌,而普通需氧培養無細菌生長,應考慮以下情況:①患者正在接受抗菌藥物**;②可能是厭氧菌感染;③標本處理不當或培養基不合適。

3.接種的平板應培養至48小時後,仍無菌生長。可報告「培養48小時無菌生長」。

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