1樓:匿名使用者
參***:
有的核酸內切酶是對某些鹼基順序或鹼基對具有專一性,因此稱為限制性內切核酸酶。
存在於細菌中,特異性非常高,主要生物學功能是降解從外面侵入細胞的dna,但不降解自身細胞中的dna。
限制酶可以識別雙鏈dna上具迴文結構的特定位點,位點長度有4—8對鹼基,切口具粘性末端或平末端,是一類極重要的工具酶。
意義:對研究dna的分子生物學家而言,限制性內切核酸酶猶如一把天賜的神刀,可以用來解剖纖細的dna分子。因此,在分析染色體結構,製作dna的限制酶譜,測定較長的dna序列、基團分離、基因重組等研究中,限制性內切核酸酶是不可缺少的工具。
限制性內切酶有哪些特點?
2樓:中國農業出版社
在20世紀60年代,人們就注意到dna在感染宿主後會被降解的現象,從而提出限制性內切酶的概念。
2023年,首次從emphasis:role=italice.coli:
emphasisk中分離到限制性內切酶,它有特定的識別位點但沒有特定的切割位點,其中切割位點離識別位點達1000bp以上。2023年,美國約翰·霍布金斯大學的**ith偶然發現,流感嗜血桿菌(emphasis:role=italichaemophilus:
influenzaeemphasis)能迅速降解外源的噬菌體dna,其細胞提取液可降解emphasis:role=italice.coli:
emphasisdna,但不能降解自身dna,從而找到emphasis:role=italichinemphasisdⅱ限制性內切酶。
emphasis:role=italichinemphasisdⅱ限制性內切酶位點和切割位點如下::role=center5′-gttc↓agac-3′:
role=center3′-caag↑tctg-5′從此以後,發現的限制性內切酶越來越多,並且許多已經在實踐中得到應用。emphasis:role=italicecoemphasisri是應用最廣泛的限制性內切酶,切割位點如下::
role=center5′g↓aattc3′:role=center3′cttaa↑g5′限制性內切酶的命名遵循一定的原則,主要依據**而定,涉及宿主的種名、菌株號或生物型。
命名時,依次取宿主屬名第一字母,種名頭兩個字母,菌株號,然後再加上序號(羅馬數字)。如emphasis:role=italichinemphasisd:
ⅲ限制性內切酶,emphasis:role=italichinemphasis指**於流感嗜血桿菌,d表示來自菌株rd,ⅲ表示序號。以前在限制性內切酶和修飾酶前加r或m,且菌株號和序號小寫,但現在限制性內切酶名稱中的r省略不寫。
2023年下半年發現615種限制酶和98種甲基化酶;2023年發現10000種細菌或古細菌中存在3000種酶,且有200多種特異性。到2023年1月,共發現4342種限制酶和甲基化酶,其中限制酶有3681種,包括i型、ⅱ型、ⅲ型限制酶各有59、3612、10種。i類限制性核酸內切酶:
由3種不同亞基構成,兼具有修飾酶活性和依賴於atp的限制性內切酶活性,它能識別和結合於特定的dna序列位點,隨機切斷在識別位點以外的dna序列,這類酶的作用需要mgsuperscript2+superscript、s腺苷甲硫氨酸及atp等的參與。
ⅲ型限制與修飾系統的酶種類更少,所佔比例不到1%,如emphasis:role=italicecoemphasisp1和emphasis:role=italicecoemphasisp15,它們的識別位點分別是agacc和cagcag,切割位點則在下游2426bp處。
在基因操作中,一般所說的限制酶或修飾酶,除非特指,均指ⅱ型限制性核酸內切酶類。與i型限制性核酸內切酶相比,ⅱ型限制性核酸內切酶的特點是其切割位點靠近識別序列,切割產生具有黏性末端或平末端的dn**段。其基本特性為:
在dna分子雙鏈的特異性識別部位,切割dna分子產生鏈的斷裂;2個單鏈斷裂部位在dna分子上的分佈通常不是彼此相對的;斷裂形成的dn**段往往具有互補的單鏈延伸末端。
3樓:皇欣溥春柔
1、能識別雙鏈分子的某種特定核苷酸序列2、使每條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷開
請詳細回答影響限制性內切核酸酶活性的因素有哪些
4樓:馡蕈子
切核酸酶意思限制性核酸內切酶識別特定核苷酸序列簡稱限制酶;ⅱ型限制性內切酶催化非甲基化dna水解;基定位基離;dna鹼基序列析、第二型(type ii)及第三型(type iii)並每條鏈特定部位兩核苷酸間磷酸二酯鍵進行切割類酶. 限制酶般切割自身dna根據限制酶結構限制酶三種型別;比較相關dna遺傳工程其理意義提高自身防禦能力iii型限制性內切酶同具修飾及認知切割作用ⅰ型限制性內切酶既能催化宿主dna甲基化限制性核酸內切酶由細菌產別第型(type i)輔需求切位與作用式催化非甲基化dna水解用於dna基組物理圖譜組建切割外源dna
限制性內切酶有幾類?各有什麼特點
5樓:soumns馬
根據限制酶的結構,輔因
子的需求切位與作用方式,可將限制酶分為三種型別,分別是第一型(type i)、第二型(type ⅱ)及第三型(type ⅲ)。
第一型限制酶
同時具有修飾(modification)及識別切割(restriction)的作用;另有識別(recognize)dna上特定鹼基序列的能力,通常其切割位(cleavage site)距離識別位(recognition site)可達數千個鹼基之遠。例如:ecob、ecok。
第二型限制酶
只具有識別切割的作用,修飾作用由其他酶進行。所識別的位置多為短的迴文序列(palindrome sequence);所剪下的鹼基序列通常即為所識別的序列。是遺傳工程上,實用性較高的限制酶種類。
例如:ecori、hindⅲ。
第三型限制酶
與第一型限制酶類似,同時具有修飾及識別切割的作用。可識別短的不對稱序列,切割位與識別序列約距24-26個鹼基對。例如:hinfⅲ。
擴充套件資料
限制性內切酶分類性質
根據酶的功能特性、大小及反應時所需的輔助因子,限制性內切酶可分為兩大類,即i類酶和ⅱ酶。最早從大腸桿菌中發現的ecok、ecob就屬於i類酶。其分子量較大;反應過程中除需mg2+外,還需要s-腺苷-l甲硫氨酸、atp;在dna分子上沒有特異性的酶解片斷,這是i、ⅱ類酶之間最明顯的差異。
因此,i類酶作為dna的分析工具價值不大。ⅱ類酶有ecor i、bamh i、hind ⅱ、hind ⅲ等。其分子量小於105道爾頓;反應只需mg2+;最重要的是在所識別的特定鹼基順序上有特異性的切點,因而dna分子經過ⅱ類酶作用後,可產生特異性的酶解片斷,這些片斷可用凝膠電泳法進行分離、鑑別。
限制性內切酶識別dna序列中的迴文序列。有些酶的切割位點在迴文的一側(如ecor i、bamh i、hind等),因而可形成粘性末端,另一些ⅱ類酶如alu i、bsur i、bal i、hal ⅲ、hpa i、**a i等,切割位點在迴文序列中間,形成平整末端。
6樓:匿名使用者
限制性內切酶主要分成三大類。第一類限制性內切酶能識別專一的核苷酸順序,並在識別點附近的一些核苷酸上切割dna分子中的雙鏈,但是切割的核苷酸順序沒有專一性,是隨機的。這類限制性內切酶在dna重組技術或基因工程中沒有多大用處,無法用於分析dna結構或克隆基因。
這類酶如ecob、ecok等。
第二類限制性內切酶能識別專一的核苷酸順序,並在該順序內的固定位置上切割雙鏈。由於這類限制性內切酶的識別和切割的核苷酸都是專一的。所以總能得到同樣核苷酸順序的dn**段,並能構建來自不同基因組的dn**段,形成雜合dna分子。
因此,這種限制性內切酶是dna重組技術中最常用的工具酶之一。這種酶識別的專一核苷酸順序最常見的是4個或6個核苷酸,少數也有識別5個核苷酸以及7個、9個、10個和11個核苷酸的。第二類限制性內切酶的識別順序是一個迴文對稱順序,即有一箇中心對稱軸,從這個軸朝二個方向「讀」都完全相同。
這種酶的切割可以有兩種方式。一是交錯切割,結果形成兩條單鏈末端,這種末端的核苷酸順序是互補的,可形成氫鍵,所以稱為粘性末端。另一種是在同一位置上切割雙鏈,產生平頭末端。
第三類限制性內切酶也有專一的識別順序,但不是對稱的迴文順序。它在識別順序旁邊幾個核苷酸對的固定位置上切割雙鏈。但這幾個核苷酸對則是任意的。
因此,這種限制性內切酶切割後產生的一定長度dn**段,具有各種單鏈末端。這對於克隆基因或克隆dn**段沒有多大用處。
限制性核酸內切酶有哪幾種型別?哪一種型別的限制酶最適合於基因
限制性內切酶主要分成三大類。第一類限制性內切酶能識別專一的核苷酸順序,並在識別點附近的一些核苷酸上切割dna分子中的雙鏈,但是切割的核苷酸順序沒有專一性,是隨機的。這類限制性內切酶在dna重組技術或基因工程中沒有多大用處,無法用於分析dna結構或克隆基因。這類酶如ecob ecok等。第二類限制性內...
下列有關基因工程中限制性內切酶的描述,錯誤的是
答案c解析 限制性內切酶存在於許多細菌及酵母菌等生物中,細菌屬於原核生物,當然可以從中提取,一種限制性內切酶只能識別一種特定的脫氧核苷酸序,並能切割dna分子,限制性內切酶的活性同樣受溫度的影響,故選c。解後思考 從高考試題的難度上來看,此題考查的知識點比較單一,內容相對簡單,主要是考查學生對基礎知...
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