1樓:
好養貼壁細胞的,請問應該用什麼濃度的膠原
解決方案如下:
1.如果你手上這支細
回胞已經傳代答次數很多的話,建議復甦一支新的細胞,這是最直接的方法
2.檢查培養基、胰酶、pbs中是否有汙染
3.如果只有手頭上的細胞,那麼檢測一下是否有支原體或者病毒感染,黑膠蟲實際是一種細胞殘留的膠質成分並不是一種汙染源但是視野中會有黑色點狀物好像懸浮細胞但略小,注意區別
4.貼壁不佳可以在傳代或復甦前選用包被液包被培養瓶,增加細胞貼壁性,一般用多聚賴氨酸包被,效果很好,可以一試
5.有時候細胞**是貼壁-懸浮-**-再貼壁的一個過程,懸浮細胞不一定都是死細胞,可能是正在**的細胞,一般來說貼壁好的細胞換液一次總會有大概5-15%再次懸浮,少量的話不必過分擔心
補充你的問題:觀察消化時間是以你的細胞在加入胰酶後變圓開始到細胞間連線消失細胞脫落為消化完成,消化時間過短鏡下觀察可能會有貼壁殘留,消化過久會損傷細胞導致狀態不佳,建議兩步法消化,效率比較高,吹打以吹散細胞為目的不必太過用力,其實吹打對細胞的損傷相比胰酶是很小的,稍加註意即可
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