1樓:匿名使用者
超氧化物歧化酶(sod)的催化底物是o2 ,一般多以一定時間內產物生成量或底物的專消耗量作為酶活屬性單位。由於o2 自身很不穩定,且不易製備,測定sod的方法除少數採用直接法外,一般多為間接法。
1.直接法 原理是根據o2 或產生o2 的物質本身的性質測定o2 的歧化量,從而確定sod的活性。經典的直接法包括:
脈衝輻射分解法、電子順磁共振波法(epr)、核磁共振法。由於所需的儀器裝置**昂貴,一般較少應用。
2.一般化學法 這些方法的共同特點是要有一個o2 的產生體系和一個被o2 還原或氧化的可檢測體系。在sod存在下,一部分o2 被sod歧化,因而o2 還原或氧化檢測體系的反應受到抑制。
根據反應受抑制程度,測定sod的活性。一般化學法有鄰苯三酚自氧化法、細胞色素c還原法、羥胺法、黃嘌呤氧化酶-nbt法、腎上腺素法、沒食子酸法、6-羥多巴胺法、亞硝酸鹽形成法和鹼性二甲亞碸法。