1樓:匿名使用者
應該是原核表達宿主菌比較準確
原核表達宿主菌之前可以表達蛋白,放一段時間不表達蛋白原因很多首先要確認其他條件是否也有改變,比如其他基因,質粒載體,表達條件等等原核表達宿主菌儲存條件沒有控制好可能導致宿主菌退化,被汙染等等,結果就造成蛋白表達變少或者不表達。
做蛋白的原核表達時為什麼總是不穩定,明明上次已經有表達了,現在又老做不出來?
2樓:匿名使用者
這個很正常,我也碰到過,有時候是找不出原因的,只能再轉化,設定重新開始,篩選穩定的了。
3樓:匿名使用者
有的時候菌株也會有影響的
求助:原核表達目的蛋白胞內發生降解
4樓:匿名使用者
應該是原核表達宿主菌比較準確 原核表達宿主菌之前可以表達蛋白,放一段時間不表達蛋白原因很多 首先要確認其他條件是否也有改變,比如其他基因,質粒載體,表達條件等等 原核表達宿主菌儲存條件沒有控制好可能導致宿主菌退化,被汙染等等,結果。能抑制多長時間你需要自己檢測。不同細胞、不同sirna、不同轉染試劑都會影響效率。
但是假設你轉染之後48小時或者72小時之後passage 細胞做mtt或者克隆形成實驗,個人覺得是可以的(前提是你有48小時或72小時knockdown證據)。
真核表達載體和原核表達載體的區別越詳細越全面越好
5樓:天馬行空設計
應該是bai原核表達宿主du菌比較準確 原核表達zhi宿主菌之前可以表達蛋白dao,版放一段時間不表達權蛋白原因很多 首先要確認其他條件是否也有改變,比如其他基因,質粒載體,表達條件等等 原核表達宿主菌儲存條件沒有控制好可能導致宿主菌退化,被汙染等等,結果。能抑制多長時間你需要自己檢測。不同細胞、不同sirna、不同轉染試劑都會影響效率。
但是假設你轉染之後48小時或者72小時之後passage 細胞做mtt或者克隆形成實驗,個人覺得是可以的(前提是你有48小時或72小時knockdown證據)。
原來表達目的蛋白的菌株現在怎麼不表達了
6樓:匿名使用者
誘導表達沒有目的蛋白產生原因無非兩種 一是誘導條件不適合目的蛋白的表達,可通過改變培養基,溫度,誘導劑等條件重新摸索出合適的誘導條件。 二是目的蛋白的菌種有問題,可通過塗板挑選單克隆菌落重新培養,或者質粒重新轉化表達菌株等方法優化菌種。
原核生物中表達真核蛋白應該注意什麼問題
7樓:匿名使用者
因為原核生物缺乏復翻譯後的制修飾,所以表達的真核蛋白和真核中表達有所差異,可能沒有生物學活性等,但是要是做免疫原應該沒問題;
基因需為cdna,不能含有內含子,原核細胞不能對mrna進行剪下;
要分析dna序列資訊,分析其密碼子,由於原核與真核生物的密碼子偏好性不同,所以有時可能會出現稀有密碼子而影響表達的情況;
要注意你要表達蛋白的大小問題,一般情況下大於70kd的蛋白在原核菌種不容易表達或表大量低;
原核表達出來的一般是包涵體,所以蛋白的復性很關鍵,否則表達出來了也不能用,沒有活性。
原核表達第一次大量表達了目的蛋白但第二次表達出的目的蛋白就很少了為什麼
8樓:小楚
目的蛋白的表達跟基因本身關係密切,載體,表達條件關係也很大。空載體能表達不代表你的蛋白能在該條件下表達。
原核表達,為什麼空載表達的很好,目的蛋白沒有表達,可能的原因有什麼?
9樓:匿名使用者
目的蛋白的表達跟基因本身關係密切,載體,表達條件關係也很大。空載體能表達不代表你的蛋白能在該條件下表達。
10樓:
目的蛋白的訊號肽是否被宿主識別?
原核表達 目的蛋白不表達怎麼辦
11樓:浮華與膚淺
目的蛋白的表達跟基因本身關係密切,載體,表達條件關係也很大。空載體能表達不代表你的蛋白能在該條件下表達。
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