1樓:匿名使用者
注射用水還是反滲水,氯離子對鱟試驗無影響。
影響鱟試劑的靈敏度的因素:內毒素標準品、鱟試劑、實驗器材、操作。
內毒素標準品:只能用中國藥品生物製品鑑定研究院的標準品,建議批號201174(160eu),不能用廠家提供的;
鱟試劑:
實驗器材:按《中國藥品檢驗標準操作規範》310頁「細菌內毒素檢查法」要求處理,洗滌只能用蒸餾水不能用純化水,否則很難出現陽性,或者買湛江博康海洋生物****的,他們的耗材最適用。
操作:按《中國藥品檢驗標準操作規範》310頁「細菌內毒素檢查法」,注意細節。
內容太多隻能打這麼多了,不善打字請諒解!
如需要幫助:0759-2732555轉603董老師
2樓:匿名使用者
1、ph值:鱟試劑生物活性在ph 6-8時酶活性穩定;ph ≤3 或≥10時,酶活性受到抑制。故鱟試驗時,供試品 ph 最好應預調和6.
8-8.0 為好,必要時可用無內毒素的 hcl 或naoh 稀溶液調節 ph 值。 2、器皿:
內毒素稀釋不宜用注射器,而應用經過校正的刻度玻璃吸管。因為注射器刻度準確度差,而且針栓壁磨沙面易吸附內毒素,試驗誤差大。同時要特別注意注射器針頭引入的鐵離子對試驗結果的干擾,鐵離子對鱟試驗反應有較強的抑制作用。
操作中常用的聚丙烯塑料管可能干擾試驗結果,故宜慎用。 3、金屬陽離子:離子對細菌內毒素測定結果影響較大,一方面陽離子如fe3+、al3+強度較大會引起內毒素的聚集造成內毒素區域性濃度過高,同時還必須注意**陽離子(如fe3+)對鱟試劑酶反應具有強抑制作用;另一方面鱟試劑必須在二價陽離子ca2+、mg2+的參與下才能被啟用形成凝膠反應。
許多藥物因ph值≥10時,其中的陰離子會吸收鱟試劑中的 ca2+、mg2+離子,使實驗呈假陰性。 4、其它物質:如血液中的凝血因子、絡合劑、抗凝劑等,都可能干擾鱟試劑與內毒素的反應,同時消毒劑和有機溶劑對鱟試驗都有抑制作用。
工作標準品內毒素要跟鱟試劑靈敏度相一致?
3樓:流浪魚
您好,測定離心管之類的東西的內毒素沒那麼複雜!
因為離心管裡的東西不會對鱟實驗檢測內毒素產生影響,實際操作過程中可以不用像新的藥品檢測內毒素一樣做干擾實驗之類的,也就不要確定最大有效稀釋倍數mvd了。
鱟試劑根據規格(裝量)加入細菌內毒素檢查用水,如果裝量大於0.1ml以上的試劑,加入細菌內毒素檢查用水溶解鱟試劑,在沒管0.1ml分裝到試管中。
內毒素工作標準品可以用細菌內毒素檢查用水將其稀釋至需要的濃度。如可以下圖稀釋。
內毒素工作標準品用於複核鱟試劑的靈敏度,以及配置陽性對照和供試品陽性對照。
測定內毒素前,需根據要求選用合適的靈敏度的鱟試劑,如果您對離心管內毒素的要求是小於0.015eu/ml,那麼就可以使用這個靈敏度的試劑。
4樓:匿名使用者
鱟試劑的靈敏度是用國家標準品來複核的
工作標準品用於陽性對照和供試品陽性對照
5樓:匿名使用者
應該用國家標準品來做陽性對照較好
6樓:匿名使用者
不是一致的,鱟試劑靈敏度是用國家標準品來複核的,不是工作標準品。
細菌內毒素標準要求小於0.50eu,購買鱟試劑選擇靈敏度單位多大的合適呢,之前沒做過這個專案請教下各位
7樓:匿名使用者
廈門鱟試劑實驗廠****有0.03eu/ml到2eu/ml各種梯度靈敏度的鱟試劑,廈門鱟試劑是國內最早從事生產鱟試劑的,鱟試劑的質量也是最好的。
8樓:匿名使用者
細菌內毒工作標準品系以細菌內毒素國家標準品為基準標定其效價,用0.5eu鱟試劑就可以,用細菌內毒素標準品(國家標準品或者工作標準品)1eu,05eu,0.25eu,0.
125eu 製成標曲,用於0.5eu鱟試劑的靈敏度複核實驗。將0.
5eu的鱟試劑和內毒素反應如果內毒素溶度超過0.5eu成凝膠(陽性),陰性是低於0.5eu的不會成凝膠,詳見藥典附錄100
9樓:匿名使用者
選擇0.25eu鱟試劑。國內有很多廠家,廈門鱟試劑,博康海洋,安度斯,福州新北。。可以貨比三家。
選擇0.125eu的鱟試劑,質控標準有些高了。。
0.25eu鱟試劑活性範圍:0.125-0.5eu(50%-200%)
0.125eu鱟試劑活性範圍:0.06-0.125eu(50%-200%)
具體可以查閱2010藥典的(細菌內毒素檢測)。。
10樓:匿名使用者
細菌內毒素標準要求小於0.50eu,是0.50eu/ml還是0.50eu/mg,兩者意義完全不同。
0.50eu/ml的限值,只能買活性高於0.50eu/ml的鱟試劑;0.50eu/mg的限值,保證鱟試劑靈敏度對應的藥品濃度無干擾即可。
使用時如沒有特殊要求建議選用0.125eu/ml的鱟試劑,建議選用湛江博康海洋生物****的鱟試劑,我比較過,國內他們的0.125eu/ml鱟試劑是最好的。
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