1樓:南京金益柏
qiagen試劑盒提取總rna的步驟
植物材料
用最精確的方法,稱取不超過100mg的植物材料,置於處理過的研缽,加入液氮進行研磨
將研磨得到的粉末,快速轉移至無rnase,並經過液氮冷卻的2ml離心管(自備),注意材料要保持冷凍狀態
加入450µl buffer rlt(1ml 加入10μl β-巰基乙醇),顛倒混勻,渦旋
將溶解物轉移至於淡紫色的qiashredder spin column,最大轉速離心2分鐘,取上清轉移至新的2ml的收集管(自備)
加0.5倍體積(約225μl)的無水乙醇,迅速吹打混勻
將樣品(約650μl )轉移至帶有2ml**管的粉色rneasy spin column(以下簡稱column),>=8000g離心15s,將濾出物丟棄
加入700µl buffer rw1至column,>=8000g離心15s清洗柱子上的濾膜,丟棄濾出物和收集管
轉移column至新的收集管(提供),加入500 µl buffer rpe,>=8000g離心15s清洗柱子上的濾膜,丟棄濾出物
再加入500µl buffer rpe,>=8000g離心2分鐘清洗柱子上的濾膜
(為了保證除淨buffer rpe,可棄舊的收集管和濾出物,取新收集管(自備)
最大轉速離心1分鐘)
轉移rneasy spin column至1.5ml收集管(提供),加入30-50µl 無rna酶的水於濾膜上,>=8000g離心1分鐘,洗脫rna
(如果預期得到的rna大於20µg,可重複第十步)
或者看說明書最好了
2樓:匿名使用者
個你是用來提取什麼的rna呀? 我們之前用過的,
oppofinder有誰用過oppo finder覺得咋樣?有沒有啥缺點?謝謝
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