1樓：
普通的慢病毒。
不加感染效率會低。
polybrene是帶正電的小分子，抵消病毒囊膜和細胞膜。
表面的陰離子。
提高慢病毒對細胞的感染效率，通常加入polybrene能提高感染效率2～10倍。但是polybrene對部分細胞有毒性，可1～10μg/ml，6-24h內無毒為標準，實驗摸索濃度。
非vsvg包膜的病毒不用polybrene，具體情況具體分析。
慢病毒空載體匯入細胞後會影響細胞的增殖嗎
2樓：匿名使用者
預實驗的目的是瞭解所操作細胞被慢病毒載體感染的容易程度，另一方面在一些情況下雖然慢病毒已經感染進入細胞，但由於表達標記基因的啟動子在該細胞內的表達效率不高，沒能觀察到感染現象。我們在預實驗方案中加入不同啟動子的病毒進行感染，並且用定量pcr測定感染後細胞內整合病毒，這樣即使病毒沒有表達也可以觀察感染。
1.感染前一天接種，使得第二天細胞匯合度為30-40%.培養板可以是96孔板（只通過顯微鏡觀察螢光）或是24孔板（通過流式或是定量pcr確定感染比例）.
2.設定不同moi值的感染組，通常設立1,2,5,10,20,50,100的感染組別，各做兩個孔，乙個孔中加入終濃度為5 μg/ml的polybrene,另一組不加。polybrene可以促進病毒對細胞的侵染，但在少數情況下它對細胞有傷害。
常用的對照病毒包括cmv-gfp,ef1a-gfp,ubic-gfp,pgk-gfp.一般細胞裡面cmv啟動子的表達活性是最強的，但在血液**的一些癌細胞中ef1a的表現要優於在一般細胞中都表達，但表達活性一般要低一些，它在神經元等原代細胞的感染中是最好的。
小時後，將培養上清丟掉同時除去沒有感染細胞的病毒，更換為新鮮的培養基。
包裝病毒的293t都能檢測出基因表達，但是感染jurkat細胞後就檢測不到了，為什麼？
3樓：笨笨的木子魚
是說你的jurkat都點亮了？但wb無表達？，如果是這樣，先q-pcr一下，如果帶tag，用tag 抗體做能避免1.
抗體本身特異性不高導致的檢測問題；2.避免內源性本底干擾，意思是tag檢測出的量就是病毒的作用的結果，就不受本身表達的影響，實在不清楚也可以找一些專業問下，比如中洪博元，他們專業度不錯。
4樓：網友
感染條件呢？有對照嗎？確定感染了？
慢病毒轉染細胞的操作步驟，求大神發乙份，感激不盡！！！
5樓：匿名使用者
你好，慢病毒轉染細胞的操作步驟如下：
1、慢病毒轉染前18-24小時，將貼壁細胞以1×10^5/孔鋪到24孔板中。使細胞在慢病毒轉染時的數量為2×10^5/孔左右。
2、第二天，用含有6 μg/ml polybrene的2ml新鮮培養基替換原培養基，加入適量病毒懸液。37℃孵育。
3、(對polybrene毒性敏感的細胞選作此步驟)4小時後加入2ml新鮮培養基以稀釋polybrene。
4、繼續培養24小時，用新鮮培養基替換含有病毒的培養基。
5、繼續培養。如果慢病毒含有螢光蛋白，一般轉染48小時後可見明顯螢光表達，72小時後更加明顯。如需facs檢測轉染效率，可在轉染後72-96小時進行。
如果慢病毒含有抗性基因並且需要加藥篩選，可以在轉染3-4天后開始加藥。
二、慢病毒轉染懸浮細胞實驗方法。
1、在2×10^5/ml懸浮細胞中加入polybrene至6 μg/ml和適量病毒，充分混勻。37℃孵育。或者150g室溫離心4小時(選作，部分難轉染的細胞系採用此步驟可以提高轉染效率)。
2、(對polybrene毒性敏感的細胞選作此步驟)4小時後(或離心結束後)加入等體積新鮮培養基以稀釋polybrene。
3、繼續培養3-4天。中間視細胞生長情況可傳代或換液。
慢病毒polybrene需要稀釋嗎
6樓：網友
終濃度為5 μg/ml，按比例加入培養皿內就行了。
判斷thp-1細胞體外培養時健康的標準或主要特點？
7樓：自心難控
通常通過提高moi值來提高病毒的轉染效率，必要時可以在培養基中加入polybrene（5-10 μg/ml）來提高病毒的感染效率。同時，目的細胞良好的生長狀態是獲得正常感染效率的保證。
8樓：幕落生存
引起這些的因素是有很多的，去看看，慢慢會好起來的。
請教polybrene 轉染
9樓：亡屍葬花季
我一直做細菌這塊，對病毒操作不是很懂公升明，請教大家：建立表達某基因的重組逆轉錄病毒載體的b16細胞系含某基因的重組逆轉錄病毒載體已獲得，需轉染pa 317包裝細胞，通過g418篩選獲得表達某基因的重組逆轉錄病毒。笭緝促狙詎繳存斜擔鉚polybrene進行陵悄轉染b16細胞，篩選陽性轉化轉殖，獲得穩定表達的b16細胞 株。
這裡怎麼具體進行操作？
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懸浮細胞病毒轉染鋪6孔板要多少細胞
10樓：網友
一般用rfect做24孔板轉染的前一天接種/鋪板（細胞計數大約5*10^4cell/ml），轉染前細胞密度在30-50%；如果細胞是原代細胞，接種密度可以密一些，細胞計數在2*10^6cell/ml；懸浮細胞可以在轉染當天接種/鋪板（細胞計數大約5*10^4cell/ml），待細胞狀態穩定後做轉染前細胞密度30-40%。
c2c12細胞是什麼細胞
11樓：普諾賽
c2c12 (小鼠成肌細胞)是由d·yaffe和o·saxel建立的小鼠成肌細胞株的亞轉殖。c2c12細胞分化很快，容易形成可伸縮的肌管並生成特徵性的肌蛋白。用骨形成蛋白2(bmp-2)處理c2c12細胞，會導致c2c12細胞的分化途徑從成肌細胞轉換為成骨圓察細胞。
c2c12細胞是橘答茄作為研究肌肉理想的細胞模型舉散。
病毒感染人體常見症狀有哪些，HIV 病毒感染人體過程
那得看什麼部位感染,人體幾乎任何部位均可被感染病毒的.hiv 病毒感染人體過程 這樣說的話太多了 為了你的20分，我簡單說一下吧 hiv病毒是依附在人體血液的cd4的細胞上的 也就是說沒有血液也就不可能感染hiv病毒 當hiv進入人體後能選擇性地侵犯有cd4受體的淋巴細胞，以cd4t淋巴細胞為主。當...
小兒病毒感染髮燒要幾天,小孩病毒感染髮燒一般幾天能好
你好，一般7天可以 多喂開水，發熱多采取物理降溫，體溫超過38.5度可以採取布洛芬懸液等藥物退熱。注意隨時觀察孩子的發燒情況。祝您健康！小孩病毒感染髮燒一般幾天能好 你好。病毒是自限性疾病，病毒感染一般一週可以自愈。但是靠寶寶自身抵抗力和病毒抗衡勉為其難。最好遵醫囑用一點抗病毒藥物 如果孩子不是很小...
病毒感染是什麼意思？可以治療嗎，病毒感染是什麼？
病毒感染是指通過多種途徑侵入機體。並在易感的宿主細胞中增殖的過程。病毒感染的實質是病毒與機體 病毒與易感細胞相互作用的過程，因為病毒的種類 機體的狀態不同產生輕重不一的損傷或者是病毒性的疾病常因病毒種類 機體狀態不同產生輕重不一的損傷或病毒性疾病。病毒致病是由侵入宿主 感染細胞開始的，致病作用表現在...