貼壁細胞計數的細胞懸液如何製備?

2025-04-05 02:45:20 字數 2172 閱讀 9660

1樓:初瑾員寒天

細胞懸液:動物細胞大體可分為懸浮細胞和貼壁細胞。這些細胞經過分離或者復甦之後,由於密度通常只比儲存介質(如培養基或生理鹽水等)稍大一點點,所以懸浮細胞和未貼壁之前的貼壁類細胞會懸浮在儲存介質中,故稱為細胞懸液。

細胞貼壁的原因:

首先,大多數的哺乳動物細胞在體內本身就附著於一定的底物而生長,而不是孤立存在的,也就是說除了天生就生活中懸液中的一些細胞,如血液中的淋巴細胞等,其它大多數細胞都是貼壁類的胡槐細胞;

其次,貼壁類的細胞外基質比較豐富,含有大量粘附分子和糖蛋白等親水性物質,適合在親水性的器皿上粘附生長。

最後說一下貼壁褲渣友的過程:懸液中的貼壁細胞在重力作用下下沉志培養瓶底,細胞開始分泌細胞外基質和粘附分子,這些粘附分子會和親水性的培養瓶相貼附,當與底物貼附後,細胞將逐漸伸展而形成一梁敏定的形態,呈成纖維細胞樣或上皮細胞樣等。

我之前專門作過乙個關於貼壁細胞和懸浮細胞的培訓ppt,需要的話我可以發給你。

懸浮細胞與貼壁細胞在培養收集過程中有哪些不同

2樓:淵源

一、貼壁生長的細胞核懸浮生長的細胞都有很多種。

活體體內的細胞當離體置於體外培養時大多數均以貼壁方式生長,主要包括正常細胞和腫瘤細胞,比如成纖維細胞,骨骼組織(骨及軟骨),心肌與平滑肌、肝、肺、腎、乳腺**神經膠質細胞,內分泌細胞,黑色素細胞及各種腫瘤細胞等。

少數細胞在體外培養是懸浮生長,包括一些取自血、脾或骨髓的培養細胞,尤其是血液白細胞以及癌腫細胞。

二、貼壁細胞與懸浮細胞在培養條件上的區別。

貼壁細胞要加血清,不貼壁的可以不加血清。

三、貼壁細胞與懸浮細胞在培養方式上的區別。

不貼壁的一般用各種搖瓶和反應器培養,貼壁的一般用方瓶或孔板培養,使用微載體時也可以用反應器培養。

四、貼壁細胞和懸浮細胞在傳代方法上的不同。

由於貼壁細胞貼壁生長,接觸抑制,長滿一瓶後貼壁較緊,不易取出。這時必須用胰蛋白酶或者膠原蛋白酶處理,使其分散開後取出,然後在放入新的培養瓶中培養。

懸浮細胞其實也有貼壁現象,只是貼壁不牢。可以直接用吹打發是細胞掉落下來,進行傳代。

五、貼壁細胞與懸浮細胞在顯微鏡下的區別。

貼壁細胞分為兩種,上皮細胞型和成纖維細胞型,在顯微鏡下觀察時,貼壁細胞在瓶底伸展並延伸成梭型或不規則的三角形或扇形,而且晃動培養液時,細胞不動。

懸浮細胞漂在培養液中,呈圓形,晃動培養液時細胞也隨著漂動。

懸液中分散的細胞為什麼很快會貼附在瓶壁上

3樓:依然狂笑

體外培養細胞重要的生長特點有:貼附和伸展以及接觸抑制和生長的密度限制。貼附並伸展,是多數體外培養細胞的基本生長特點。

雖然血細胞如淋巴細胞在活體體內並無聚集的傾向並在體外可於懸浮狀態中生長,但是大多數的哺乳動物細胞在體內和體外均附著於一定的底物而生長,在體外時這些底物可以是其他細胞、膠原、玻璃或塑料等。培養細胞在未貼附於底物之前一般均似球體樣;當與底物貼附後,細胞將逐漸伸展而形成一定的形態,呈成纖維細胞樣或上皮細胞樣等。細胞附著於底物時並非一種需要能量的過程,一般認為與電荷有關。

據資料記載,37℃時在2 min內細胞之間即可形成鍵,該鍵可對胰蛋白酶起作用且僅發成於細胞之間,而細胞與底物之間則無;8 min後才有穩定的鍵形成。

一些特殊的促細胞附著的物質(如層粘連蛋白、纖維鏈結蛋白、iii型膠原、血清擴充套件因子等)可能參加細胞的貼附過程。這些促細胞附著因子均為蛋白質,存在於細胞膜表面或培養液尤其血清之中。在培養過程中,這些帶陽電荷的促貼附因子先吸附於底物上,懸浮的圓形細胞再與已吸附有促貼附物質的底物附著,以後細胞將伸展成其原來的形態。

一般來說,從底物脫離下來的貼附生長型細胞,不能長期在懸浮中生長而將逐漸退變,除非這是一些轉化了的細胞或惡性腫瘤細胞。

細胞怎麼計數,不是懸浮液那種,就是固體組織切片

4樓:匿名使用者

細胞怎麼計數,不是懸浮液那種,就是固體組織切片。

固體顆粒分散於液體中,因布朗運動而不能碼槐運很快下沉,此時固體分散相與液體的混合物稱懸浮液。懸浮液中的固體顆粒的粒徑為10^-3~10^-4cm,大於膠體。

泥沙是由微小的泥土粒子懸浮在水中而成的懸膠(體).懸膠(體遲梁)與溶膠不同,其中分散相的粒子較大,穩定性較小,容易沉澱分出。製備懸浮液時通常可加入分明譁散劑,使懸浮穩定。

分散劑的作用多半為調節介質黏度或界**性質,阻礙粒子接近粘並。

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