1樓：蕾真夏菀
氫氧化鈉在還原糖的檢驗實驗中的作用：氫氧化鈉用於生成氫氧化銅（
因為反應條件一定要是新制的），通過與醛基反應鑑定還原糖。還原糖的檢驗實驗：1、原理樣品經除去蛋白質後，在加熱條件下，直接滴定已標定過的費林氏液，費林氏液被還原析出氧化亞銅後，過量的還原糖立即將次甲基藍還原，使藍色褪色。
根據樣品消耗體積，計算還原糖量。2、適用範圍gb5009.7-85，本方法適用於所有食品中還原糖的檢測。
檢出限0.1mg。3、主要儀器滴定管4、試劑除特殊說明外，實驗用水為蒸餾水，試劑為分析純。
（1）費林甲液：稱取15g硫酸銅（cuso4·5h2o），及0.05g次甲基藍，溶於水中並稀釋至1l。
（2）費林乙液：稱取50g酒石酸鉀鈉與75g氫氧化鈉，溶於水中，再加入4g亞鐵***，完全溶解後，用水稀釋至500ml，貯存於橡膠塞玻璃瓶內。（3）乙酸鋅溶液：
稱取21.9g乙酸鋅，加3ml冰乙酸，加水溶解並稀釋至100ml。（4）亞鐵***溶液。
稱取10.6g亞鐵***，用水溶解並稀釋至100ml。（5）鹽酸。
（6）葡萄糖標準溶液：精密稱取1.000g經過80℃乾燥至恆量的葡萄糖（純度在99%以上），加水溶解後加入5ml鹽酸，並以水稀釋至1l。
此溶液相當於1mg/ml葡萄糖。（注：加鹽酸的目的是防腐，標準溶液也可用飽和苯甲酸溶液配製）5、操作方法5.
1樣品處理：5.1.
1乳類、乳製品及含蛋白質的食品：稱取約0.5～2g固體樣品（吸取2～10ml液體樣品），置於100ml容量瓶中，加50ml水，搖勻。
邊搖邊慢慢加入5ml乙酸鋅溶液及5ml亞鐵氫化鉀溶液，加水至刻度，混勻。靜置30min，用乾燥濾紙過濾，棄去初濾液，濾液備用。（注意：
乙酸鋅可去除蛋白質、鞣質、樹脂等，使它們形成沉澱，經過濾除去。如果鈣離子過多時，易與葡萄糖、果糖生成絡合物，使滴定速度緩慢；從而結果偏低，可向樣品中加入草酸粉，與鈣結合，形成沉澱並過濾。）5.
1.2酒精性飲料：吸取50ml樣品，置於蒸發皿中，用1mol/l氫氧化鈉溶液中和至中性，在水浴上蒸發至原體積1/4後，移入100ml容量瓶中。
加25ml水，混勻。以下按4.1.
1自"加5ml乙酸鋅溶液"起依法操作。5.1.
3含多量澱粉的食品：稱取2～5g樣品，置於100ml容量瓶中，加50ml水，在45℃水浴中加熱1h，並時時振搖（注意：此步驟是使還原糖溶於水中，切忌溫度過高，因為澱粉在高溫條件下可糊化、水解，影響檢測結果。
）。冷後加水至刻度，混勻，靜置。吸取50ml上清液於另一100ml容量瓶中，以下按4.
1.1自"5ml乙酸鋅溶液"起依法操作。5.
1.4汽水等含有二氧化碳的飲料：吸取50ml樣品置於蒸發皿中，在水浴上除去二氧化碳後，移入100ml容量瓶中，並用水洗滌蒸發皿，洗液併入容量瓶中，再加水至刻度，混勻後，備用。
（注意：樣品中稀釋的還原糖最終濃度應接近於葡萄糖標準液的濃度。）5.
2標定費林氏液溶液：吸取5.0ml費林氏甲液及5.
0ml乙液，置於150ml錐形瓶中（注意：甲液與乙液混合可生成氧化亞銅沉澱，應將甲液加入乙液，使開始生成的氧化亞銅沉澱重溶），加水10ml，加入玻璃珠2粒，從滴定管滴加約9ml葡萄糖標準溶液，控制在2min內加熱至沸，趁沸以每兩秒1滴的速度繼續滴加葡萄糖標準溶液，直至溶液蘭色剛好褪去並出現淡黃色為終點，記錄消耗的葡萄糖標準溶液總體積，平行操作三份，取其平均值，計算每10ml（甲、乙液各5ml）鹼性酒石酸銅溶液相當於葡萄糖的質量（mg）。（注意：
還原的次甲基藍易被空氣中的氧氧化，恢復成原來的藍色，所以滴定過程中必須保持溶液成沸騰狀態，並且避免滴定時間過長。）5.3樣品溶液**：
吸取5.0ml費林氏甲液及5.0ml乙液，置於150ml錐形瓶中，加水10ml，加入玻璃珠2粒，控制在2min內加熱至沸，趁沸以先快後慢的速度，從滴定管中滴加樣品溶液，並保持溶液沸騰狀態，待溶液顏色變淺時，以每秒1滴的速度滴定，直至溶液蘭色褪去，出現亮黃色為終點。
如果樣品液顏色較深，滴定終點則為蘭色褪去出現明亮顏色（如亮紅），記錄消耗樣液的總體積。（注意：如果滴定液的顏色變淺後復又變深，說明滴定過量，需重新滴定。
）5.4樣品溶液測定：吸取5.
0ml鹼性酒石酸銅甲液及5.0ml乙液，置於150ml錐形瓶中，加水10ml，加入玻璃珠2粒，在2min內加熱至沸，快速從滴定管中滴加比**體積少1ml的樣品溶液，然後趁沸繼續以每兩秒1滴的速度滴定直至終點。記錄消耗樣液的總體積，同法平行操作兩至三份，得出平均消耗體積。
6、計算x3=（c×v1×v）∕（m×v2×1000）×100式中：x--樣品中還原糖的含量(以葡萄糖計)，%；c--葡萄糖標準溶液的濃度，mg/ml；v1--滴定10ml費林氏溶液（甲、乙液各5ml）消耗葡萄糖標準溶液的體積，ml；v2--測定時平均消耗樣品溶液的體積，ml；v--樣品定容體積，ml；m--樣品質量，g；7、注意事項（1）本方法測定的是一類具有還原性質的糖，包括葡萄糖、果糖、乳糖、麥芽糖等，只是結果用葡萄糖或其他轉化糖的方式表示，所以不能誤解為還原糖=葡萄糖或其他糖。但如果已知樣品中只含有某一種糖，如乳製品中的乳糖，則可以認為還原糖=某糖。
（2）分別用葡萄糖、果糖、乳糖、麥芽糖標準品配製標準溶液分別滴定等量已標定的費林氏液，所消耗標準溶液的體積有所不同。證明即便同是還原糖，在物化性質上仍有所差別，所以還原糖的結果只是反映樣品整體情況，並不完全等於各還原糖含量之和。如果已知樣品只含有某種還原糖，則應以該還原糖做標準品，結果為該還原糖的含量。
如果樣品中還原糖的成分未知，或為多種還原糖的混合物，則以某種還原糖做標準品，結果以該還原糖計，但不代表該糖的真實含量。
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