1樓:匿名使用者
你可以先用標準溶液做一個標準曲線,然後,在標準曲線上計數。應該不會錯。
2樓:匿名使用者
分光光度計標準曲線與所用儀器,標準溶液,及背景/空白溶液等有關,沒法相互比較。
分光光度計測葡萄糖濃度
3樓:匿名使用者
先用標準葡萄糖試劑(可在試劑門市部買到),用蒸餾水配成已知的標準溶液(一般配回0.5%、1%、3%、5%、7%五個濃度的溶答液即可),分別在分光光度計上(最好465微米處)測定光密度(吸光度)。以光密度為橫座標,濃度(%)為縱座標,在座標紙上標出5個點的座標值,連線各點,得一條直線,就是所謂「標準曲線」。
然後就在光度計上測你的未知葡萄糖溶液的光密度,在標準直線上找到該光密度相對應的濃度值(%),你的工作就完成了。此方法一天可測定100多個葡萄糖樣品。
4樓:寶石飛機
在中國藥典2005二部中測定葡萄糖注射液中葡萄糖含量用旋光法,可以一試:
含量測定: 精密版量取本品適量(約權相當於葡萄糖10g),置100ml量瓶中,加氫試液0.2ml(10%或10%以下規格的本品可直接取樣測定),用水稀釋至刻度,搖勻,靜置10分鐘,依法測定旋光度(附錄vi e),與2.
0852相乘,即得供試量中含有c6h12o6·h2o的重量(g)。
葡萄糖沒有紫外和可見吸收,用分光光度計測定要考慮顯色問題。可以用蒽酮-硫酸法,顯色後在625nm處測定。
分光光度計如何繪製標準曲線
5樓:棟瀾庹若英
物質對光的吸收是具有選擇性的,各種不同的物質都具有其各自的吸收光譜,因此當某單色光通過溶液時,其能量就會被吸收而減弱,光能量減弱的程度和物質的濃度有一定的比例關係,也即符合於比色原理---比耳定律。
本儀器是可見光分光光度計,其波長範圍為360
nm~800
nm,具有測量被測溶液透光率(t)值,吸光度(a),濃度直讀,模擬訊號輸出等功能。分光光度技術主要是利用物質特有的吸收光譜來鑑定物質性質及含量的技術,其理論依據是lambert和beer定律。
使用方法:
(1)儀器預熱。開啟樣品室蓋(光門自動關閉)。開啟電源,指示燈亮,儀器預熱20
min。選擇開關置於「t」旋鈕,使數字顯示為「00.0」。
(2)旋動波長手輪,把所需波長對準刻度線。
(3)將裝有溶液的比色皿放置比色架中,令參比溶液置於光路。
(4)蓋上樣品室蓋,調節透光率「100%t」旋鈕,使數字顯示為「100.0t」。(如顯示不到100%t,則可加按一次。
(5)吸光度a的測量:儀器調t為0和100%後,將選擇開關轉換至a調零旋鈕,數字顯示應為「.000」。然後拉出拉桿,使被測溶液置入光路,數字顯示值即為試樣的吸光度a。
(6)測定完畢後,先開啟樣品室蓋,再斷電源。比色杯應清洗乾淨後,再貯放儲存。
(7)濃度直讀
按mode鍵,使conc批示燈亮,交已標定濃度的溶液
移入光路,按下溶液調節鍵(↑100%t鍵的↓0%鍵),使數字顯示為標定值,將被測溶液移入光路,即讀出相應濃度值。
(8)儀器數字顯示背後,裝有接線柱,按下func鍵,可輸出模擬訊號
6樓:
分光光度法中製作標準曲線及影響因素
標準曲線是直接用標準溶液製作的曲線,是用來描述被測物質的濃度(或含量)在分析儀器響應訊號值之間定量關係的曲線。在分光光度法分析中,被測物質的濃度在儀器上的響應訊號值在一定範圍內呈直線關係,水樣測定的結果可以從標準曲線上查出。因此標準曲線製作的好壞,將會影響測定結果的準確度。
1標準曲線的表示式標準曲線應是一條通過原點的直線,如果座標上各濃度點基本在一條直線上可不進行迴歸處理,但在實驗中不可避免地存在測定誤差,往往會有
一、二點偏離直線,此時可用最小二乘法進行迴歸分析,然後繪製曲線,通常稱為迴歸直線,而代表迴歸直線方程叫回歸方程,表示式為:y=bx+a(式中:b為直線斜率,a為y軸上的截距,x為被測溶液的濃度,y為吸光度,是多次測定結果的平均值)。
在實際工作中,製作標準曲線的目的,是要藉助它來查出水樣中被測物質的濃度,而不是由x值通過迴歸方程去求得最可靠的y值,為了便於將觀察到儀器響應訊號值代入迴歸方程中直接計算試樣的濃度或含量,勿需去繪製標準曲線再從曲線上查出被測物的濃度,改用下式計算;x=by+a(式中:a為x軸線上的截距,其它解釋同前)。2標準曲線的引數標準曲線有3個引數,即相關係數r,斜率b
繪製標準曲線的意義
以某一特定波長條件下由分光光度計分別測出一系列不同溶度標準溶液然的吸光度值,以吸光光度值為縱座標,相應的溶液濃度為橫座標,在座標紙上可作出一條吸光度與濃度成正比通過原點的直線,稱作標準曲線。~~~繪製標準曲線的實用意義就是隻要測得其吸光度值即可在標準曲線上查出相應的濃度值。。
7樓:掘墳使者
標準曲線的作法
(1)標準液濃度的選擇:在製備標準曲線時,標準液濃度選擇一般應能包括待測樣品的可能變異最低與最高值,一般可選擇5種濃度。濃度差距最好是成倍增加或等級增加,並應與被測液同樣條件下顯色測定。
(2)標準液的測定:在比色時,讀取光密度至少讀2-3次,求其平均值,以減少儀器不穩定而產生的誤差。
(3)標準曲線圖的繪製:一般常用的是光密度一濃度標準曲線。
1用普通方格紙作圖。圖紙最好是正方形(長:寬=l:
1)或長方形(長:寬=3 :2),以橫軸為濃度,縱軸為光密度,一般濃度的全距佔用了多少格,光密度的全距也應占用相同的格數。
在適當範圍內配製各種不同濃度的標準液,求其光密度,繪製標準曲線,以濃度位置向上延長,光密度位置向右延長、交點即為此座標標點。然後,將各座標點和原點聯成一條線,若符合lambert-beer氏定律,則系通過原點的直線。
2若各點不在一直線,則可通過原點,儘可能使直線通過更多點,使不在直線上的點儘量均勻地分佈在直線的兩邊。
3標準曲線繪製完畢以後,應在座標紙上註明實驗專案的名稱,所使用比色計的型號和儀器編號、濾光片號碼或單色光波長以及繪製的日期、室溫。
4繪製標準曲線:一般應作二次或三次以上的平行測定,重複性良好曲線方可應用。
5繪製好的標準曲線只能供以後在相同條件下操作測定相同物質時使用。當更換儀器、移動儀器位置、調換試劑及室溫有明顯改變時,標準曲線需重新繪製。
6標準曲線橫座標的標度:從標準液的含量換算成待測液的濃度。
用分光光度計做標準曲線,怎麼做,為什麼做?
8樓:一生一個乖雨飛
標準曲線是指通過測定一系列已知組分的標準物質的某理化性質,從而得到該性質的數值所組成的曲線。標準曲線是標準物質的物理/化學屬性跟儀器響應之間的函式關係。
在分析化學實驗中,常用標準曲線法進行定量分析,通常情況下的標準工作曲線是一條直線。與校正曲線不同,它是以標準溶液及介質組成的標準系列,標繪出來的曲線。
校正曲線的標準系列的伴生組分必須與試樣相匹配,以便測量結果的準確。只有標準曲線與校正曲線相重合的條件下,才可以用標準曲線來代替校正曲線。
9樓:黑桃森林
以標準溶液摩爾濃
bai度為橫標,吸du光度為縱標。測不同標zhi液的吸光
dao度,並在座標上描點。之版後做一權條過原點的直線,保證各點分佈在直線附近即可,這條直線叫標準曲線。測樣品吸光度,在縱標上引平行於橫標的直線,與標準曲線交叉。
過交點引橫標垂線,落到橫標上即得知樣品濃度了。
10樓:尋夢
1、配製相應的標準系抄列;2、以
什麼是分光光度法的標準曲線?繪製標準曲線有什麼意義?
11樓:demon陌
分光光度法的標準曲線定義:
標準曲線是直接用標準溶液製作的曲線,是用來描述被測物質的濃度(或含量)在分析儀器響應訊號值之間定量關係的曲線。
在分光光度法分析中,被測物質的濃度在儀器上的響應訊號值在一定範圍內呈直線關係,水樣測定的結果可以從標準曲線上查出。因此標準曲線製作的好壞,將會影響測定結果的準確度。
繪製標準曲線意義:繪製標準曲線的實用意義就是隻要測得其吸光度值即可在標準曲線上查出相應的濃度值。
通過測定被測物質在特定波長處或一定波長範圍內光的吸收度,對該物質進行定性和定量分析的方法。它具有靈敏度高、操作簡便、快速等優點,是生物化學實驗中最常用的實驗方法。
分光光度計調0，調100問題,分光光度計使用時為什麼要用空白調0和100的透光率，為什麼超過1的數值不能用，為什麼要做空白試驗。
不管放沒放試劑，一律都是開蓋調0，關蓋調100。還要記住如果是剛開機調好波長後，需要預熱15 20分鐘才可測試。測試時調0調100時要使對照管對準光路。比色杯推到最裡面時 推杆時以聽到 感覺到有 咔嗒 聲為到位 最前面的第一隻比色杯對準光路。分光光度計使用時為什麼要用空白調0和100的透光率，為什麼...
用分光光度計做標準曲線，怎麼做，為什麼做
標準曲線是指通過測定一系列已知組分的標準物質的某理化性質，從而得到該性質的數值所組成的曲線。標準曲線是標準物質的物理 化學屬性跟儀器響應之間的函式關係。在分析化學實驗中，常用標準曲線法進行定量分析，通常情況下的標準工作曲線是一條直線。與校正曲線不同，它是以標準溶液及介質組成的標準系列，標繪出來的曲線...
分光光度計法標準曲線中的迴歸方程是怎麼回事
就是先用標準物質配製不同濃度在分光光度計上測吸光度，然後用所測得的吸光度和濃度用線性迴歸方程解，得出一個標準曲線。標準曲線的迴歸方程 這就好比用計算器很容易 按出 極複雜的算式結果，可是人們還是要從1 2 3 數數學起，然後加 減 乘 除，再負數，解方程，冪，指數 對數等等的不厭其煩的學習一樣。要知...