1樓：滾遠點兒
-20度儲存半年之內問題不大。如果不放心可以-80度儲存。避免反覆凍融
細胞培養液中蛋白用elisa怎麼檢測
2樓：匿名使用者
是細胞分泌的蛋白的話，直接在培養皿中鋪入一定量的細胞，培養3天，細胞達到80-90%時，收取細胞培養上清液，離心去除沉澱，取上清測定濃度，用於elisa檢測。對照組為新鮮培養液。
如何收集細胞上清做elisa
3樓：匿名使用者
是培養基，但也有細胞分泌的可溶性的蛋白。所以一般大家都是需要離心的，去掉一些大分子的雜質之後再做elisa的。 elisa檢測細胞上清液總細胞因子的處理實驗步驟：
1、取細胞培養上清液500ul； 2、4度，6000rpm離心5－10min； 3、取上清。是細胞分泌的蛋白的話，直接在培養皿中鋪入一定量的細胞，培養3天，細胞達到80-90%時，收取細胞培養上清液，離心去除沉澱，取上清測定濃度，用於elisa檢測。對照組為新鮮培養液。
細胞培養液中蛋白用elisa怎麼檢測
4樓：人蔘__苦短
是細胞分泌的蛋白的話，直接在培養皿中鋪入一定量的細胞，培養3天，細胞達到80-90%時，加藥的時候換無血清培養基，作用完後收集細胞培養上清液，3000rpm,4℃ 離心10min，取上清液。elisa檢測時，不同因子的稀釋度，要事先做個預實驗確定。對照組為新鮮培養液。
5樓：南京金益柏生物科技****
一般來說檢測細胞內的蛋白質需要破碎細胞，非結構蛋白較易提取，破碎細胞後離心取上清即可。而結構性蛋白則需破碎脂膜提取蛋白，具體方法可參照膜蛋白提取的相關文獻。提取的總蛋白需定量，然後以每mg或g的蛋白的相同濃度稀釋後用於測定。
提取時注意要保持低溫及加入必要蛋白酶抑制劑(protease inhibitor)。
有人做過分泌蛋白的western/elisa檢測麼
6樓：匿名使用者
western/elisa檢測都很靈敏，抄應該沒有問題。如bai果實在擔
心量少，可以用du透析袋和peg先濃縮，再透zhi
析濃縮。雖然這兩種方dao法都很靈敏，但是比方說6孔板的一個孔的細胞用60ulripa裂解，得到60ul樣品。但是收集到的培養基有2ml，而且可以認為培養基中總蛋白量應該比細胞內要少，如果不能濃縮到比60ul體系還小，那蛋白濃度就會比細胞裂解樣品的少。
細胞培養基上清液需要做elisa，需要加入蛋白酶抑制劑嗎
7樓：
如果是檢測上清液中的蛋白，那麼一般不用，除非你要測定的蛋白特殊需要。
請教收集細胞培養上清液的方法
8樓：北京索萊寶科技****
把要收集上清的細胞重新在一次性培養板中培養，如果是貼壁細胞的話，在收集前24小時，改用不完全培養基培養，即用不加血清的培養基。收集的時候，用移液槍吸取上清即可。
如何濃縮細胞培養液中可能存在的分泌蛋白
9樓：匿名使用者
如何濃縮細胞
bai培養液中可du能存在的分泌蛋zhi
白有二種可能性dao:
1.你的細胞裂解和抽提專
過程可能出了問屬題,你的蛋白是分泌蛋白,所以在訊號肽被切掉前(蛋白分泌出細胞前)是嵌入在膜上,如果你使用的抽提液不夠強的話,胞內蛋白可能沒有溶出,而是在細胞碎片上,沒有加入到wb膜上. 你的陽性對照可能本來是個胞內蛋白,所以沒有問題,建議選用一個膜蛋白或其他分泌蛋白作為陽性對照.
2.還有一種可能就是你的蛋白在細胞內的濃度太低,而你的抗體檢測靈敏度不高.
第一種可能性要大.
如何做細胞elisa
10樓：翰林學庫
如果是單層貼壁細胞表達上清，可以用移液器移取；
如果是懸浮細胞，需要對細胞進行離心，而後獲得上清。
11樓：匿名使用者
你好，可以諮詢下上海基爾頓生
培養t細胞的培養基要不要加血清,細胞培養基加了血清後還可以過濾麼
可以加也可以不加，不加的話就用無血清培養基。無血清培養基 是不需要新增血清就可以維持細胞在體外較長時間生長繁殖的合成培養基。它的基本成分為基礎培養基及新增組分兩大部分。新增組分包括以下幾大類物質 1 促貼壁物質 2 促生長因子及激素 如胰島素。3 結合蛋白和轉運蛋白 常見如轉鐵蛋白和牛血清白蛋白。4...
使用6孔細胞培養板培養細胞時,培養基放多少毫升
所加培養液的液麵不宜太深,一般在2 3mm範圍,結合孔的底面積就可算出適宜加液量.若加液量過多會影響氣體 氧氣 交換,而且在搬動過程中易溢位造成汙染.細胞培養基中培養的細胞正常時是什麼形態 簡單的說就是細胞能夠按照本身狀態生長與增殖.懸浮細胞靜止狀態下,微貼壁與培養表面.貼壁細胞鋪展於培養表面.細胞...
比較動物細胞培養液和植物細胞的培養基有什麼區別
植物細胞培養要加無機物,有機物.特別注意生長素和細胞 素,在不同時期加的量不同.動物細胞培養要加糖,氨基酸,無機鹽等等.由於還有一些營養物質未搞清楚,所以還要加血清,血漿等天然成分.動物細胞培養與植物組織培養的區別請問動物細胞 您好！1.培養 基不同 植物細胞 固體培養基 動物細胞 液體培養基 2....