1樓：百優生物
第一個，你可以找copy一找你的師兄弟有沒bai有，du再找一找同學有沒有？zhi如果有的話就省了這dao筆錢。
或者用你們手頭現有的質粒去換。
如果沒有，可以找一些國內的公司去買，因為一些不好明說的原因，國內一些公司也有一些。這樣會便宜一些。
如果放心不下，那就如樓上說的，去merck/novagen公司購買，當然這**就高一些，估計在幾千塊錢吧，不同質粒**不一樣。
2樓：匿名使用者
pet系列載體可以去merck/novagen公司購買http://www.merck-chemicals.
com.cn/life-science-research/pet/chinese/c_2tob.s1okacaaaejwhl9.
zlx具體**要詢問你回
當地的**答商
3樓：德元
北京德元國際科技****
在原核表達蛋白時，由於用的是原核表達載體pet28a，屬於卡那抗性，但忘加卡那了，這樣影響大不大?
4樓：匿名使用者
理論上影響是比較復大的，原核lb培養不加制抗生素的話，很容易出現丟失了帶有外源基因質粒的生長速度比目的菌的生長速度快得多的情況。最後的結果就是影響目的蛋白的表達量。
所以如果這個蛋白表達培養的實驗是第一次做的話，建議重做一遍以保證資料的準確。如果不是第一次做的話，可以對比下之前的表達資料驗證下是否有影響。
載體pet28a構建重組質粒，測序準確，轉至bl21原核表達蛋白，，怎麼也誘導不出來？同批次的bl21別人能誘導
5樓：匿名使用者
1 可能是太弱你看不出來，建議用his抗體做個western 看看是不是有條帶而看不出。
2 是不是融解性太差，建議將你的氨基酸序列做個疏水性分析。如果確實如此的話可能要重新構載體
6樓：美吉生物
換個載體試試，是經常有這種情況的，怎麼表達都表達出來，換個載體就表達出來了，你可以試下
7樓：匿名使用者
有可能是表達量太小，先做個wb驗證下
iptg濃度感覺有點大，我們實驗室最大不超過1mm,一般是0.2mm。
如果可以還是換個載體，感覺28a不怎麼好純化
請問什麼是穿梭質粒載體和表達質粒載體
穿梭質粒是指可以在多種宿主下複製。比如說通常能夠在哺乳動物，酵母或者其他細菌複製表達的質粒，同時可以在大腸桿菌內複製。這樣利於對質粒的分子生物學操作和大量製備。表達質粒就是指帶有啟動子，增強子等等，使其在宿主體內不僅僅是可以複製，還能夠通過轉錄翻印，在宿主內表達出相應蛋白的質粒 所謂穿梭，即即可以在...
載體構建時，如何區分質粒是真核表達還是原核表達，二者的啟動子
這個做你就有點盲目了，我覺得你應該先確定你要原核表達，還是真和表達，確定後，在選擇質粒。正如你所說載體是可以構建的，所以質粒作為載體，其啟動子也是可以構建的，現在實驗室往往自己構建所需要的載體進行表達，就是我需要什麼樣的質粒，我就構建什麼樣的質粒。明白哇。質粒的啟動子不同之處在於原核和真核表達體系的...
酶將質粒載體與目的的基因構建為基因表達載體，有幾
基因表達載體的構建 即目的基因與運載體結合 是實施基因工程的第二步，也是基因工程的核心。其構建目的是使目的基因能在受體細胞中穩定存在，並且可以遺傳給下一代，同時，使目的基因能夠表達和發揮作用。將目的基因構建在表達載體上的方法有哪些 有兩種常用的方法。第一種是直接將pcr擴增的基因片段酶切，然後連線到...