1樓:匿名使用者
加溶液2後不要劇烈搖晃,溶液2處理時間不能太久,一般顛倒6-8次即加溶液3中和,這都是為了避免鹼裂解基因組;
加溶液3後要混合充分,離心後取上清小心不要吸到白色沉澱,那裡有組蛋白包著的基因組dna。
2樓:廣州雙螺旋基因技術****
進行分子檢測操作時,操作人員應該嚴格遵守一些操作規程,最大程度地降低可能出現的pcr汙染或杜絕汙染的出現。
1)實驗分割槽:實驗操作最好在三個不同的區域內進行,pcr的前處理和後處理要在不同的隔離區內進行:
各工作區要有一定的隔離,操作器材專用,要有一定的方向性。如:試劑準備
→標準制備→pcr擴增區及分析區。
切記:任何一間的產物及器材不要拿到其他兩個工作區。
2)分裝試劑:可把試劑反應液先分裝成20ul 的小管(pcr管,一次分裝不宜過多,以一週用完為宜),嚴格-20℃儲存;用時把分裝好的小管拿出加入模板即可。pcr擴增所需要的試劑均應在生物安全櫃、裝有紫外燈的超淨工作臺或負壓工作臺配製和分裝。
所有的加樣器和吸頭需固定放於其中,不能用來吸取擴增後的dna和其他**的dna。
3)嚴格取樣。取樣需要按照取樣規程來,做到專物專用(如取樣袋、剪刀等),禁止一物用在多個樣品上。
4)清潔實驗環境,減少陽性殘留。每次使用完的檯面、超淨臺或者生物安全櫃都需及時清理,酒精擦拭、紫外照射。有條件的話,實驗區要保持通風換氣。
5. 擴增產物處理。分子檢測的環境汙染大部分都是擴增產物的氣溶膠汙染;對於擴增產物要做到:1)儘量不開蓋;2)及時處理,丟棄時需放入密封袋中密封好再處理。
6. 實驗工具的定期清潔。實驗服、移液槍等都需定期清洗。
7. 勤換手套。樣品前處理完後,需換新的手套進行配液操作。
8. 嚴格按照說明書中的注意事項進行操作。
9. 注意通風換氣。每次實驗都要保證排氣扇或風扇的執行。
pcr實驗室汙染了怎麼處理?
3樓:北京索萊寶科技****
出現汙染後,我們首先考慮可能是試劑的汙染,更換新批號的hbv試劑重新檢測後,結果仍為全部標本陽性。
將hbv標本拿到其他正規的pcr實驗室檢測,結果標本中陰、陽性結果都有,陰性對照是陰性,陽性對照是陽性,說明標本沒有被汙染將兩種批號的hbv試劑拿到其他正規的pcr實驗室檢測,也顯示試劑沒有問題。
我實驗室用消毒液擦拭工作臺面後,開啟所有的紫外燈照射一天,將所使用微量進樣器、離心管、槍頭、手套、記號筆、記錄本等都更換掉,再將hbv標本進行檢測,結果全部標本仍然為陽性。
用消毒液擦拭工作臺面後,開啟所有的紫外燈照射一天,將hbv標本重新檢測,同時設定了兩個陰性對照(a和b),a 陰性對照為將試劑的反應管從試劑盒中拿,開啟反應管的蓋子,在空氣中暴露10 min,蓋上蓋子,上機檢測;b陰性對照為將試劑的反應管從試劑盒中拿,不開蓋子,直接上機檢測。結果是全部標本和a陰性對照為陽性,而b陰性對照為陰性。
至此,雖然還查詢不到汙染源是什麼,但有一點可以肯定,pcr實驗室汙染是氣溶膠擴散而引起的後來經過調查,發現汙染是由於本室工一位工作人員在打掃實驗室衛生時,用擴增區的掃笤和拖把打掃了標本製備區的衛生引起。
在確定了汙染的原因後,我們就開始著手排除汙染,每天都開啟整個pcr 實驗室的門窗和排氣扇,讓整個實驗室通風,用消毒液擦拭整個pcr實驗室,開啟所有的紫外燈照射。
每隔3 d按3.5步驟檢測一次,一直這樣處理了一個月,a陰性對照才轉為陰性。連續檢測三次a和b陰性對照,每次結果都均為陰性,才確定pcr實驗室恢復正常。
通常我們對pcr實驗室汙染的預防是採取隔離不同操作區、分裝試劑、改進實驗操作等規則,對汙染的處理是用稀鹽酸擦拭或浸泡;紫外線照射法等 ]。而對於實驗室的通風方面沒有給予足夠的重視,為了防止實驗區間之間的相互汙染,各個實驗區間都是儘可能的密閉,從而使得實驗室出現pcr產物殘留汙染的機率增大。從本次pcr實驗室汙染排除的過程來看.我覺得汙染得以排除的一個關鍵是通風。
適當的給予實驗室通風,可起到空氣稀釋的作用,有利於pcr產物殘留量的減少,加快實驗室汙染的排除。
4樓:廣州雙螺旋基因技術****
a. 實驗室進行通風處理,至少2 周的時間;
通風可加速擴增產物的消散的速度
b. 使用清水對實驗檯面、實驗室進行清洗;
dna不溶於酒精,使用清水多次擦拭後可消除附在實驗檯面等的核酸dna;
c. 使用紫外燈進**間的照射;
紫外線及產生的臭氧都有破壞dna結構的作用d. 之前使用的滅菌鍋使用清水清洗多次,不要和耗材等在一起滅菌;
e. 可用1mol/l 的鹽酸對可疑器具或者實驗檯面進行浸泡或擦拭。
鹽酸可使dna脫嘌呤,破壞dna的結構。
f. 若有條件,選擇一個新的實驗環境進行檢測實驗最好。
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用紫外燈照射實驗室用酒精擦洗儀器
衛生部門對醫學pcr實驗室建設有何要求
醫學pcr實驗室是屬於生物安全實驗室,國家藥監局有相應的規範標準。如果有關pcr實驗室規劃設計與建設裝修施工的問題,建議你去諮詢一下中山科瓦特的工程師。什麼叫做pcr實驗室 復 pcr實驗室又叫基制 因擴增實驗室。baipcr是聚合酶鏈式反du應 polymerase chain reaction ...
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為便於實驗室順利完成國家實驗室認可的申請 通過評審與取證工作,現將實驗室申請認可要求及國家實驗室認可申請過程簡要介紹如下。1.申請要求 實驗室法律地位的證明檔案 沒有變化時,僅在初次評審和複評審時提供 實驗室現行有效的質量手冊和程式檔案 擴大認可範圍時可不提供 實驗室進行最近一次完整的內部稽核和管理...
實驗室有機廢氣如何安全處理,實驗室廢氣怎麼處理,一般用到什麼方法
樓主您好,根據您提出的問題,下面為您做詳細解答 實驗室中對產生少量有毒氣體的實驗應在通風櫥內進行。通過排風裝置將少量毒氣排到室外 使排出氣在外面大量空氣中稀釋 以免汙染室內空氣。產生毒氣量大的實驗必須備有廢氣處理裝置。如no2 so2 cl2 h2s hf等可用導管通入鹼液中使其大部分吸收後排出,c...