1樓：
這個要看你是具體如何克隆的
如果你使用的是酶切連線，選擇不同黏末端的酶一般不會發生自身環化如果是平端連線，則需要對載體去磷，也就是鹼性磷酸酶處理。此時需要注意你的插入片段兩邊要有磷酸基團（可以引物合成時新增，也可設計平端的酶如ecorv自己回來切），否則是連不上的。
以前回答過，注意搜尋
2樓：匿名使用者
找切割位點時，讓兩端的黏性末端不同，我只知一種。幫你查過具體可採用以下方法：
（1）用鹼性磷酸酶處理限制酶酶解產生的線性載體分子。鹼性磷酸酶可除去線性載體dna 分子的5¹-磷酸，而留下3¹-羥基基團。經過鹼性磷酸酶處理的線性載體分子，除非插入外源dna 片段，否則就不能重新環化為有功能的載體分子。
（2）採用同聚物加尾連線技術，可自動防止線性載體dna 分子的自身環化作用，這是因為切割後形成的線性dna 分子的兩個3¹-oh末端，此時都已被加上具有同樣鹼基結構的同聚物尾巴。
（3）應用柯斯質粒，也可防止質粒dna 分子發生自身環化作用。需要指出的是，在連線反應中，正確配載入體dna 與外源dna 間的比例，是高效獲得重組體的一個重要因素。在應用λ噬菌體或柯斯質粒作載體時，如果配置高比值的載體dna /外源dna 的連線反應體系，就有利於重組體分子的形成；在應用質粒作載體時，因為其重組體分子是由一個載體分子和一個外源dna 片段環化而成的，所以當載體dna 與外源dna 的比例為1時，最有利於重組體分子的形成。
基因工程裡，用兩種不同的限制酶一起切割質粒和含目的基因的dna，可以防止質粒和目的基因自身環化，那
3樓：棄療的梅大鳥
取下一段目的基因要切兩次，也就是說這裡切的兩次可以
分兩種不同的酶來切，同回樣的，載體也需要切兩次同樣也答是用這兩種酶來切，這樣有兩組鹼基的互補配對，就可以避免載體和載體配對以及目的基因和目的基因配對。（不太確定啊。。。。。）
4樓：
限制性內切bai酶識別特定的酶切位點，
du作zhi用於dna分子鏈上磷酸二酯dao鍵，同種限制酶才回能切割出相同的粘性答末端。連線時，相同的粘性末端通過鹼基互補配對，在dna連線酶的作用下形成磷酸二酯鍵。基因工程的主要步驟：
1、目的基因的獲得；2、目的基因與表達載體的連線；3、表達載體向宿主的轉化。
質粒載體的四個基本特徵
5樓：匿名使用者
條件：①要具有限制酶的切割位點②要有標記基因（如抗性基因）以便於重組質粒的篩選③能夠在宿主細胞中穩定存在並複製④是安全的對細胞無害
6樓：匿名使用者
1,有多個限制酶切割位點;具有標記基因;能在宿主細胞中自主複製;不損害宿主細胞
2,不知道什麼是基因克隆..這個是基因工程的步驟....
獲取目的基因;把目的基因匯入載體;把載體匯入受體細胞;目的基因的檢測與表達
3,4 123來不及回答的很好`
我只是補充一下,1,2條是在生物書上的..自我感覺比他的稍準確點..嘿嘿``
7樓：123來不及
1 具有自我複製的能力；有1到多個限制酶切割位點；有標記基因（抗藥性基因）；對宿主細胞無害
2 獲取目的基因；構建表達載體；匯入受體細胞；對目的基因的檢測和鑑定
3 一個羊的體細胞的細胞核取出，放入另一隻羊去核的卵細胞中，將這個新組建的細胞放入第三隻羊的子宮內，生出的小羊就是“多莉”。這是利用核移植技術進行的克隆。
4 比如轉基因技術培育的抗蟲棉，可以提高棉花對害蟲的抵抗能力，這是對人類有利的；但如果將克隆技術濫用的話，可能產生很多社會法律方面的糾分。
學文的不需對這一部分做深入瞭解。必修二中對基因工程有一些初步介紹，只把那個搞清楚就行了。
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