1樓：匿名使用者
應該沒有那麼複雜，就本人的經驗，向你提供幾種可能：
1. 柱子連線問題，柱頭留了較大的死體積，形成兩次展寬——解決辦法，重新連線柱子；
2. 如果保留時間大幅提前，則可能是10%的甲醇衝的時間太長了，形成疏水塌陷——解決辦法，用甲醇和乙腈交替衝柱，各10倍柱體積就行了，反覆2次；
3. 流動相里混進了鹼，柱子報廢——解決辦法，換柱子；
4. 做的樣品是蛋白質、多肽等大分子物質，因在柱上吸附致柱效下降——解決辦法，用0.1%tfa（水）和0.
1%tfa（乙腈：異丙醇（1：2）），倒衝，跑0-100%的梯度3次；（這種情況下應該用300埃的柱子，90埃的容易堵）；
5. 操作錯誤，如流動相用錯等——解決辦法，仔細核對色譜條件；
就這麼多了，希望能有幫助，也希望知道真實原因。
2樓：匿名使用者
你怎麼儲存的？
用的時候不能用酸性鹼性過強的流動相，用完後一定要用有機相和水相梯度沖洗幾遍（可能的話直接衝過夜），尤其是你用的流動相有酸、鹼、緩衝液、鹽等東西的時候一定要換成蒸餾水好好沖洗。
另外最後儲存的時候一定要把柱子裡灌滿有機溶解（甲醇或乙腈），衝至平衡，一定不能留水在裡面（尤其是酸性的水液）。
20個柱體積不夠，你是不是用酸鹼鹽了？你最好用甲醇（乙腈）-水 梯度100%-10% （每次梯度至少20min）反覆洗滌，另外用乙腈儲存比甲醇好。
3樓：匿名使用者
新買色譜柱需要看廠家出廠的時候用什麼溶劑儲存的額，再進行相應的處理，使用，儲存，正常情況下最好用甲醇與水比例八十五比十五的比例儲存的，純有機相容易揮發的，即使你密封兩端了