瓊脂糖凝膠電泳中DNA分子遷移率受哪些因素的影響

2025-01-16 07:50:20 字數 1600 閱讀 3890

1樓:網友

膠濃度,dna分子大小,電壓的大小,時間的長短,額,忘記了。

瓊脂糖凝膠電泳中dna分子遷移率受哪些因素的影響

2樓:潤澤且老實灬瑰寶

影響瓊脂糖凝膠電泳。

中dna分子遷移率。

的因素:dna的分子大小、瓊脂糖濃度、dna分子的構象、電源電壓、嵌入染料的存在、離子強度影響,瓊脂糖主要在dna製備電泳中作為一種固體支援基質,其密度取決於瓊脂糖的濃度。

dna的分子大小:線狀雙鏈dna分子在一定濃度瓊脂糖凝膠中的遷移速率與dna分子量對數成反比,分子越大則所受阻力越大,也越難於在凝膠孔隙中蠕行,因而遷移得越慢。

瓊脂糖濃度:乙個給定大小的線狀dna分子,其遷移速度在不同濃度的搜散跡瓊脂糖凝膠中各不相同,dna電泳遷移率的對數與凝膠濃度成線性關係,凝膠濃度的選擇取決於dna分子的大小,分離小於的dna所需膠濃度是,分離大於10kb的dna分子所需膠濃度為,dna大小間於兩者之間則所需膠濃度為。

dna分子的構象:dna分子處於不同構象時,它在電場中移動。

距離不僅和分子量有關,還和它本身構象有關,相同分子量的線狀、開環和超螺旋dna在瓊掘伏脂糖凝膠中移動速度是不一樣的,超螺旋dna移動最快,而開環雙鏈dna移動最慢。

電源電壓:在低電壓時,線狀dna的遷移速率與所加電壓成正比,但是隨著電場強度。

的增加,不同分子量的dna的遷移率將以不同的幅度增長,片段越大,因場強公升高引起的遷移率公升高幅度也越大。

嵌入染料的存在:螢光染料溴化乙啶用於檢測瓊脂糖凝膠中的dna,染料會嵌入到堆積的鹼基對之間並拉長線狀和帶缺口的環狀dna,使其剛性更強,還會世並使線狀dna遷移率降低15%。

離子強度影響:電泳緩衝液。

的組成及其離子強度影響dna的電泳遷移率,在沒有離子存在時(如誤用蒸餾水。

配製凝膠),電導率。

最小,dna幾乎不移動,在高離子強度的緩衝液中(如誤加10×電泳緩衝液),則電導很高並明顯產熱,嚴重時會引起凝膠熔化或dna變性。

dna在瓊脂糖中的電泳遷移速率與溫度的關係

3樓:宣選

溫度越高,電泳遷移速率越快。

溫度越低,電泳遷移速率越慢。

線狀雙鏈dna分子。

在一定濃度瓊脂糖凝膠中的遷移速率與丁一。

分子量對數。

成反比。分子越大,則所受阻力越大,也難於在凝膠分中挪動,因而遷移得越慢。

乙個給定大小的線狀dna分子,其速率在不同濃度的裙子。銀堂中各不相同,dna電泳遷移速率的對數與凝膠濃度成線性關係。凝膠濃度的選擇取決於dna的大小。

下列關於dna瓊脂糖凝膠電泳表述正確的是

4樓:禿頭小李頭

下列關於dna瓊脂巨集敬山糖凝膠電泳表述正確的是。

a.凝膠融化時一稿賀定要充分加熱,使凝膠溶液沸騰一會兒再停止加熱,並立刻倒入制膠蔽中槽。

b.因上樣緩衝液中含有指示劑,凝膠電泳後可直接觀察到dna條帶。

c.不同長度的線性dna分子具有不同的電泳遷移率。

d.長度相同的dna分子電泳遷移率一致。

正確答案:不同長度的線性dna分子具有不同的電泳遷移率。

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