1樓：娛樂影視君
這是由其初始產物經氧化二聚作用形成的靛藍染料，它使具gus活性的部位或位點呈現藍色，用肉眼或在顯微鏡下可看到，且在一定程度下根據染色深淺可反映出gus活性。 因此利用該方法可觀察到外源基因在特定器官、組織，甚至單個細胞內的表達情況。 根據gus基因檢測所用的底物不同，可以選擇三種檢測方法：
組織化學法、分光光度法和螢光法（靈感度為分光光度檢測法最高）。其中最為常用的是組織化學法。 擴充套件資料 gus基因存在於等一些細菌基因組內，編碼β-葡萄糖苷酸酶。
葡萄糖苷酸酶是乙個水解酶，以β-葡萄糖苷酸酯類物質為底物，其反應產物可用多種方法檢測出來。 βd - 葡糖醛酸酶（gus基因編碼）是從大腸桿菌k- 12 菌株分離出的一種酸性水解酶，能催化許多β-葡萄糖苷酯類物質的水解。其中很多水解產物具有髮色團或形成螢光物質，採用某種β-葡萄糖苷酶作底物，其反應產物可用分光光度，螢光和組織化學的方法檢測。
其中組織化學法是催化的底物是x-gluc，產物為藍色化合物，該方法可觀察到外源基因在特定器官，組織，甚至單個細胞內的表達情況。可以用定量pcr檢測gus的表達量，也可以用酶標儀檢測gus蛋白的量。都行。
一般都是檢測蛋白的量。
2樓：帳號已登出
因為瞬時的潑墨速度不同而導致顏色顯示以及吸收率不同。
進而導致染色不均，出現一定的反差。
3樓：浮華落盡
根據你的描述，這種甚至表達的染色不均，也要求的技術含量也比較高，建議還是找專業的人員來分析判斷。
4樓：伊佐篩難
請教哪位大神： 投稿的時候，審稿人問。
求助，轉基因菸草gus染色一直染不出來
5樓：網友
我做過這方面的試驗，就把我知道的一些說一說吧。首先，你要用dna作跑pcr確定轉基因是否成功，如果未成功，定量表達肯定是零；其次，（1）做定量是一件非常精細的工作，操作需要非常的謹慎和嚴格，如果操作不當，也可能影響表達；（2）檢查你的引物是否能用，且具有較高的特異性，我一般是退火溫度在58~60度；（3）確定你跑定量的模板也就是rna的質量，跑定量的rna要求很高，要濃度高且完全沒有雜質；（4）加樣要快，定量的酶確保沒有失活，酶要一直放在冰上，加完樣樣品也要放冰上，我的酶都是用的時候才從冰箱拿出來，用完馬上放回冰箱；（5）我們實驗室做定量時一般用的都是新的無菌水、dntp等，避免rna被降解或汙染，暫時就想到了這麼多，資料顯示零的時候我不放心會再跑一次，如果還是零，我會從以上幾條中逐個排查，彆著急，慢慢來。
菸草瞬時表達中注射完的葉片為什麼不立即檢測
6樓：匿名使用者
蛋白表達和積累需要時間，一般48-72 h，超過72 h可能會降解。
7樓：匿名使用者
菸草製作完成。
再經行包裝。
就成了香菸，香菸是。
一邊燒一邊抽的，
原位雜交 與 gus 染色 需不需要都做
8樓：翰林學庫
如果要進行亞細胞定位的話，一般都是用gfp，而組織定位個人感覺gus比較方便，染色專之後普通顯微鏡下都可看不需屬要使用共聚焦！
一般模式植物的研究兩者都會採用，南瓜沒有轉化體系就不能夠做gus,只能做原位雜交來解決或者是免疫組化（需要抗體）。
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gus染色材料如何透明？.請生意經的朋友幫忙
9樓：閃神抑漣
但是切片儲存時間不長，（3）用甘油磷酸緩衝液100ml加入60mg的對苯二胺具有抗螢光衰減作用，脫水的要求比較高。||先用90%acetone，-20c至少兩個小時，然後gus，37c2hr-overnight，然後70%酒精脫色就可以透明瞭|||問問專家吧|||石蠟切片gus組織化學染色後的切片透明主要（1）如果用的封片劑是有機物，如阿拉伯樹膠等，脫水徹底才能使切片透明，（2）如果用水相緩衝液封片則不用脫水處理，但是切片儲存時間不長，（3）用甘油磷酸緩衝液100ml加入60mg的對苯二胺具有抗螢光衰減作用，脫水的要求比較高。
gus染色中，丙酮固定的作用是什麼，是沉積蛋白嗎？
10樓：網友
丙酮會使蛋白質會發生性質上的改變而凝結起來．這種凝結是不可逆的，不能再使它們恢復成原來的蛋白質．蛋白質的這種變化叫做變性．
也是用來固定蛋白質的一種固定液。
各種染色方法對要顯示物件是不同的，各種材料對固定劑的要求也不一樣。
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