1樓：網友
利用外標法做乙個濃度與峰面積（或峰高）的標準曲線。
用待測樣品的峰面積在曲線上代入，得到樣品的濃度，是對待測物的定量分析。
2樓：鵂鶹
外標法：用待測組分的純品作對照物質，以對照物質和樣品中待測組分的響應訊號相比較進行定量的方法稱為外標法。此法可分為工作曲線法及外標一點法等。
工作曲線法是用對照物質配製一系列濃度的對照品溶液確定工作曲線，求出斜率、截距。在完全相同的條件下，準確進樣與對照品溶液相同體積的樣品溶液，根據待測組分的訊號，從標準曲線上查出其濃度，或用迴歸方程計算，工作曲線法也可以用外標二點法代替。通常截距應為零，若不等於零說明存在系統誤差。
工作曲線的截距為零時，可用外標一點法(直接比較法)定量。
外標一點法是用一種濃度的對照品溶液對比測定樣品溶液中i組分的含量。將對照品溶液與樣品溶液在相同條件下多次進樣，測得峰面積的平均值，用下式計算樣品中i組分的量：
w＝a(w)／(a)
式中w與a分別代表在樣品溶液進樣體積中所含i組分的重量及相應的峰面積。(
高效液相色譜原理是什麼？
3樓：華凌聊民生
高效液相色譜儀原理是在條件一定，樣品濃度很低時時，k只取決於組分的性質，而與濃度無關。這只是理想狀態下的色譜條件，在這種條件下，得到的色譜峰為正常峰；在許多情況下，隨著濃度的增大，k減小，這時色譜峰為拖尾峰；而有時隨著溶質濃度增大，k也增大，這時色譜峰為前延峰。
高效液相色譜儀器使用
高效液相色譜法只要求樣品能製成溶液，不受樣品揮發性的限制，流動相可選擇的範圍寬，固定相的種類繁多，因而可以分離熱不穩定和非揮發性的、離解的和非離解的以及各種分子量範圍的物質。
與試樣預處理技術相配合，hplc所達到的高解像度和高靈敏度，使分離和同時測定性質上十分相近的物質成為可能，能夠分離複雜相體中的微量成分。隨著固定相的發展，有可能在充分保持生化物質活性的條件下完成其分離。
hplc成為解決生化分析問題z有前途的方法。由於hplc具有高解像度、高靈敏度、速度快、色譜柱可反覆利用，流出組分易收集等優點，因而被廣泛應用到生物化學、食品分析、醫藥研究、環境分析、無機分析等各種領域。高效液相色譜儀與結構儀器的聯用是乙個重要的發展方向。
高效液相色譜原理是什麼？
4樓：kk解夢
以高壓下的液體為流動相，並採用顆粒極細的高效固定相的柱色譜分離技術。構造可分為高壓輸液幫浦，色譜柱，進樣器，檢測器以及資料獲取與處理系統等部分。
與氣相色譜法相比，液相色譜法不受樣品揮發性和熱穩定性及相對分子質量的限制，只要求把樣品製成溶液即可，非常適合於分離生物大分子、離子型化合物，不穩定的天然產物以及其他各種高分子化合物等。此外液相色譜的流動相不僅起到使樣品沿色譜柱移動的作用，而且與固定相一樣，與樣品分子發生選擇性的相互作用。
高效液相色譜法的原理是什麼？
5樓：惠企百科
高效液相色譜法的原理是以液體為流動相，採用高壓輸液系統，將具有不同極性的單一溶劑或不同比例的混合溶劑、緩衝液等流動相幫浦入裝有固定相的色譜柱，在柱內各成分被分離後，進入檢測器進行檢測。
高效液相色譜法有「四高一廣」的特點：
高壓：流動相為液體，流經色譜柱時，受到的阻力較大，為了能迅速通過色譜柱，必須對載液加高壓。
高速：分析速度快、載液流速快，較經典液體色譜法速度快得多，通常分析乙個樣品在15～30分鐘，有些樣品甚至在5分鐘內即可完成，一般小於1小時。
高效：分離效能高。可選擇固定相和流動相以達到最佳分離效果，比工業精餾塔和氣相色譜的分離效能高出許多倍。
高靈敏度：紫外檢測器可達，進樣量在μl數量級。
應用範圍廣：百分之七十以上的有機化合物可用高效液相色譜分析，特別是高沸點、大分子、強極性、熱穩定性差化合物的分離分析，顯示出優勢。
高效液相色譜法的原理是什麼？
6樓：惠企百科
色譜法是一種分離技術，試樣混合物的分離過程也就是試樣中各組分在稱之為色譜分離柱中的兩相間不斷進行著的分配過程。
其中的一相固定不動，稱為固定相；
另一相是攜帶試樣混合物流過此固定相的流體（氣體或液體），稱為流動相。
當流動相中攜帶的混合物流經固定相時，其與固定相發生相互作用。由於混合物中各組分在性質和結構上的差異，與固定相之間產生的作用力的大小、強弱不同，隨著流動相的移動，混合物在兩相間經過反覆多次的分配平衡，使得各組分被固定相保留的時間不同，從而按一定次序由固定相中流出。與適當的柱後檢測方法結合，實現混合物中各組分的分離與檢測。
按兩相狀態分類：
氣體為流動相的色譜稱為氣相色譜（gc）g-s & g-l；
液體為流動相的色譜稱液相色譜（lc）l-s 和l-l。
高效液相色譜儀的工作原理？
7樓：好學者百科
高效液相色譜儀工作原理；高壓幫浦將貯液罐的流動相經進樣器送入色譜柱中，然後從檢測器的出口流出，這時整個系統就被流動相充滿。當欲分離樣品從進樣器進入時，流經進樣器的流動相將其帶入色譜柱中進行分離，分離後不同組分依先後順序進入檢測器，記錄儀將進入檢測器的訊號記錄下來，得到液相色譜圖。
高效液相色譜法是在經典色譜法的基礎上，引用了氣相色譜的理論，在技術上，流動相改為高壓輸送，色譜柱是以特殊的方法用小粒徑的填料填充而成，從而使柱效大大高於經典液相色譜（每公尺塔板數可達幾萬或幾十萬），同時柱後連有高靈敏度的檢測器，可對流出物進行連續檢測。
中為什麼要求色譜柱柱溫穩定，而高效液相色譜柱不
高效液相色譜中分離度為0是什麼原因 要改善的條件很多，介紹幾種供參考 1 色譜柱，色譜柱使用時間長了，柱效會降低，會影響到分離度的，改善方法是更換新的色譜柱。如果已經是新的色譜柱了，分離度還不好，那可以採用更長一些的色譜柱，也會增加分離度。2 流動相的調節，通過調節流動相中各組分的比例，使流動相的極...
用什麼指標來判斷高效液相色譜中兩峰的分離效果
分離度 無論是定性鑑別還是定量分析,均要求待測峰與其他峰 內標峰或回特定的雜質對照峰答之間有較好的分離度。分離度 r 的計算公式為 2 t r2 t r1 r w 1 w 2 式中 t r2 為相鄰兩峰中後一峰的保留時間 t r1 為相鄰兩峰中前一峰的保留時間 w 1 及w 2 為此相鄰兩峰的峰寬。...
在高效液相色譜中梯度洗脫裝置的作用是什麼
梯度洗脫裝置分兩種 高壓梯度 用兩臺高壓輸液泵將兩種溶劑輸入 低壓梯度 在常壓下將兩種溶劑 或多元溶劑 混合，然後用高壓輸液泵將流動相輸入到色譜柱中。梯度洗脫可提高分離度 縮短分離時間 降低最小檢測量和提高分離精度。但在使用中，梯度洗脫也有許多與等度洗脫不同的地方需要注意。梯度洗脫時應注意 1 注意...