1樓：
底物濃度;酶濃度;溫度;離子強度和ph值;輔助因子;啟用劑;抑制劑
進行酶活力測定時應注意什麼
2樓：匿名使用者
測定酶活力時，必須注意以下幾點：
（1）酶促反應過程中，只有最初一段時間內反應速度與酶濃度成正比，隨著反應時間的延長，反應速度即逐漸降低。
（2）要規定一定的反應條件，如時間、溫度、ph等，並在酶測定過程中保持這些反應條件的恆定，如溫度不得超過規定溫度的士1℃，ph應恆定。
（3）配製的底物濃度應準確且足夠大，底物液中應加入不抑制該酶活力的防腐劑並儲存於冰箱中，以防止底物被分解。
（4）標本要新鮮，由於絕大多數酶可因久置而活力降低，標本如無法及時測定，應儲存於冰箱中。用血漿時，應考慮到抗凝劑對酶反應的影響。有些酶在血細胞、血小板中的濃度比血清高，為此在採血、分離血清時，應注意防止溶血和白細胞的破裂。
（5）在測定過程中，所用儀器應絕對清潔，不應含有酶的抑制物，如酸、鹼、蛋白沉澱劑等。
酶活力測定的注意事項有哪些？
3樓：匿名使用者
1．底物濃度 除選擇適合的底物外，在實際應用中更多考慮的是底物濃度。由於[s]與反應速度v成雙曲線關係，在酶活性測定時，要求[s]達到一定水平以保證酶活性與酶量成正比。[s]範圍一般選擇在10～20km為宜，此時反應速度基本達到最大反應速度，測定的誤差在可接受範圍。
2．酶濃度 在反應條件一定時，酶濃度與反應速度成正比。按照中間產物學說，只有[s]>>[e]時，酶才能被底物分子飽和，反應速度才能達到最大值。因此當標本酶活力過高時，應將標本適當稀釋後再加以測定。
3．溫度 不同的酶最適溫度可以不同，多數酶的最適溫度在37～40℃，高於或低於最適溫度，酶活性都降低。目前，酶活性的測定溫度尚未統一，但常規實驗室多使用37℃。溫度對酶促反應的影響程度通常用溫度係數(q10)表示。
溫度係數指溫度每升高10℃，化學反應速度增加的倍數。q10通常為l～2。由溫度係數得知，溫度的變化對酶活性有著重要影響，因此要求酶活性測定要在恆溫條件下進行，溫度波動要控制在±1℃。
4．離子強度和ph值 在最適ph時，酶的活性最強，高於或低於最適ph，酶的活性都降低，多數酶的最適ph在5～8之間。在測定酶活性時，要求緩衝液具有足夠的緩衝容量，以便使ph值保持穩定。血漿或血清標本含有多種緩衝溶質，具有較強的緩衝能力。
為了防止血漿或血清標本緩衝溶質對反應液酸鹼度的影響，使ph不致偏離設定值，標本用量不宜過大，血漿或血清標本體積／反應液體積≤1／10為宜。
5 輔助因子 某些金屬離子和維生素類輔酶是結合酶的輔助因子，例如zn2+是羧基肽酶的輔基，mo6+是黃嘌呤氧化酶的輔基，nadh是不需氧脫氫酶的輔酶。這些酶離開它們的輔基或輔酶就不能表現活性，因此在酶活性測定時，就要保證輔基或輔酶的供給。
6．啟用劑 有些酶在有啟用劑存在時才有活性或活性較高，例如mg2+是肌酸激酶的啟用劑，cl-是澱粉酶的啟用劑。因此在酶活性測定時，也要滿足酶對啟用劑的需要。
7．抑制劑 酶的抑制可分為不可逆抑制和可逆抑制，後者又可分為競爭性抑制和非競爭性抑制。重金屬離子和砷化物對巰基酶的抑制、有機磷對羥基酶的抑制屬於不可逆抑制；丙二酸對琥珀酸脫氫酶的抑制、磺胺類藥物對二氫葉酸合成酶的抑制屬於競爭性抑制；哇巴因對na+，k+-atp酶的抑制屬於非競爭性抑制。抑制劑使酶活性降低，在測定酶活性時，應避免抑制劑的影響。
綜上所述，測定酶活性時，最適條件的選擇應該遵循最適底物濃度、最適溫度、最適ph值、滿足輔助因子和啟用劑、避免抑制劑的原則。
酶活力測定的注意事項有哪些
4樓：筆中從沫
測定酶活力時，必須注意以下幾點：
1、酶促反應過程中，只有最初一段時間內反應速度與酶濃度成正比，隨著反應時間的延長，反應速度即逐漸降低。
2、要規定一定的反應條件，如時間、溫度、ph等，並在酶測定過程中保持這些反應條件的恆定，如溫度不得超過規定溫度的士1℃，ph應恆定。
3、配製的底物濃度應準確且足夠大，底物液中應加入不抑制該酶活力的防腐劑並儲存於冰箱中，以防止底物被分解。
4、標本要新鮮，由於絕大多數酶可因久置而活力降低，標本如無法及時測定，應儲存於冰箱中。用血漿時，應考慮到抗凝劑對酶反應的影響。有些酶在血細胞、血小板中的濃度比血清高，為此在採血、分離血清時，應注意防止溶血和白細胞的破裂。
5、在測定過程中，所用儀器應絕對清潔，不應含有酶的抑制物，如酸、鹼、蛋白沉澱劑等。
5樓：匿名使用者
1．底物濃度 除選擇適合的底物外，在實際應用中更多考慮的是底物濃度。由於[s]與反應速度v成雙曲線關係，在酶活性測定時，要求[s]達到一定水平以保證酶活性與酶量成正比。[s]範圍一般選擇在10～20km為宜，此時反應速度基本達到最大反應速度，測定的誤差在可接受範圍。
2．酶濃度 在反應條件一定時，酶濃度與反應速度成正比。按照中間產物學說，只有[s]>>[e]時，酶才能被底物分子飽和，反應速度才能達到最大值。因此當標本酶活力過高時，應將標本適當稀釋後再加以測定。
3．溫度 不同的酶最適溫度可以不同，多數酶的最適溫度在37～40℃，高於或低於最適溫度，酶活性都降低。目前，酶活性的測定溫度尚未統一，但常規實驗室多使用37℃。溫度對酶促反應的影響程度通常用溫度係數(q10)表示。
溫度係數指溫度每升高10℃，化學反應速度增加的倍數。q10通常為l～2。由溫度係數得知，溫度的變化對酶活性有著重要影響，因此要求酶活性測定要在恆溫條件下進行，溫度波動要控制在±1℃。
4．離子強度和ph值 在最適ph時，酶的活性最強，高於或低於最適ph，酶的活性都降低，多數酶的最適ph在5～8之間。在測定酶活性時，要求緩衝液具有足夠的緩衝容量，以便使ph值保持穩定。血漿或血清標本含有多種緩衝溶質，具有較強的緩衝能力。
為了防止血漿或血清標本緩衝溶質對反應液酸鹼度的影響，使ph不致偏離設定值，標本用量不宜過大，血漿或血清標本體積／反應液體積≤1／10為宜。
5 輔助因子 某些金屬離子和維生素類輔酶是結合酶的輔助因子，例如zn2+是羧基肽酶的輔基，mo6+是黃嘌呤氧化酶的輔基，nadh是不需氧脫氫酶的輔酶。這些酶離開它們的輔基或輔酶就不能表現活性，因此在酶活性測定時，就要保證輔基或輔酶的供給。
6．啟用劑 有些酶在有啟用劑存在時才有活性或活性較高，例如mg2+是肌酸激酶的啟用劑，cl-是澱粉酶的啟用劑。因此在酶活性測定時，也要滿足酶對啟用劑的需要。
7．抑制劑 酶的抑制可分為不可逆抑制和可逆抑制，後者又可分為競爭性抑制和非競爭性抑制。重金屬離子和砷化物對巰基酶的抑制、有機磷對羥基酶的抑制屬於不可逆抑制；丙二酸對琥珀酸脫氫酶的抑制、磺胺類藥物對二氫葉酸合成酶的抑制屬於競爭性抑制；哇巴因對na+，k+-atp酶的抑制屬於非競爭性抑制。抑制劑使酶活性降低，在測定酶活性時，應避免抑制劑的影響。
綜上所述，測定酶活性時，最適條件的選擇應該遵循最適底物濃度、最適溫度、最適ph值、滿足輔助因子和啟用劑、避免抑制劑的原則。
測定酶活力要注意控制哪些條件？
6樓：暖萱紫菱
1．底物濃度 除選擇適合的底物外，在實際應用中更多考慮的是底物濃度。由於[s]與反應速度v成雙曲線關係，在酶活性測定時，要求[s]達到一定水平以保證酶活性與酶量成正比。
2．酶濃度 在反應條件一定時，酶濃度與反應速度成正比。按照中間產物學說，只有[s]>>[e]時，酶才能被底物分子飽和，反應速度才能達到最大值。因此當標本酶活力過高時，應將標本適當稀釋後再加以測定。
3．溫度 不同的酶最適溫度可以不同，多數酶的最適溫度在37～40℃。高於或低於最適溫度,酶活性都降低。
4．離子強度和ph值 在最適ph時，酶的活性最強，高於或低於最適ph，酶的活性都降低。
5 輔助因子 某些金屬離子和維生素類輔酶是結合酶的輔助因子。這些酶離開它們的輔基或輔酶就不能表現活性，因此在酶活性測定時，就要保證輔基或輔酶的供給。
6．啟用劑 有些酶在有啟用劑存在時才有活性或活性較高。因此在酶活性測定時也，要滿足酶對啟用劑的需要。
7．抑制劑 酶的抑制可分為不可逆抑制和可逆抑制，後者又可分為競爭性抑制和非競爭性抑制。重金屬離子和砷化物對巰基酶的抑制、有機磷對羥基酶的抑制屬於不可逆抑制；丙二酸對琥珀酸脫氫酶的抑制、磺胺類藥物對二氫葉酸合成酶的抑制屬於競爭性抑制；哇巴因對na+，k+-atp酶的抑制屬於非競爭性抑制.抑制劑使酶活性降低,在測定酶活性時，應避免抑制劑的影響。
7樓：匿名使用者
1保持待測材料的酶活 2在分光光度計下待測是控制反應時間
在測定酶活力時應注意哪些反應條件？為什麼
8樓：遊戲
底物濃度;酶濃度;溫度;離子強度和ph值;輔助因子;啟用劑;抑制劑
測定酶活力時應遵循哪些基本原則
9樓：邂逅
（1）酶促反應過程中，只有最初一段時間內反應速度與酶活性成正比，隨著反應時間的延長，反應速度即逐漸降低。
（2）要規定一定的反應條件，如時間、溫度、ph等，並在理酶測定過程中保持這些反應條件的恆定，如溫度不得超過規定溫度的士1℃，ph應恆定。
（3）配製的底物濃度應準確且足夠大，底物液中應加入不抑制該酶活力的防腐劑並儲存於冰箱中，以防止底物被分解。
（4）標本要新鮮，由於絕大多數酶可因久置而活力降低，標本如無法及時測定，應儲存於冰箱中。用血漿時，應考慮到抗凝劑對酶反應的影響。有些酶在血細胞、血小板中的濃度比血清高，為此在採血、分離血清時，應注意防止溶血和白細胞的破裂。
在測定酶活力時應注意哪些反應條件?為什麼?
10樓：蓋蓋好胸
溫度，酸鹼性，酶濃度，這些都是影響酶活性的主要因素
11樓：匿名使用者
底物濃度；酶濃度；溫度；離子強度和ph值；輔助因子；啟用劑；抑制劑
準確測定酶活力的實驗順序是，酶活力測定實驗中，對實驗結果影響最大的是哪個步驟，是各試劑的吸取嗎，為什麼？
加入復緩衝液 加入底制物 加入酶 保溫並計時 一段時間後檢測產物的量 酶活力也稱為酶活性，是指酶催化一定化學反應的能力。酶活力的大小可用在一定條件下，酶催化某一化學反應的速度來表示，酶催化反應速度愈大，酶活力愈高，反之活力愈低。2016全國卷一 加入緩衝液 加入底物 加入酶 保溫並計時 一段時間後檢...
酶活性測定的原理是什麼,酶活力的常用測定方法？
超氧物歧化酶 superoxide di utase，sod 活性的測定 sod採用氮藍四唑 nitro blue tetrazolium，nbt 法 beauchamp和fridovich，1971 反應步驟為 取200 l粗提液，加入3.7 ml nbt反應液50mmol lph7.8的磷酸緩衝...
測定酶活力時，為什麼要控制酶的稀釋倍數
1 底物濃度 除選擇適合的底物外，在實際應用中更多考慮的是底物濃度。由於 s 與反應速度v成雙曲線關係，在酶活性測定時，要求 s 達到一定水平以保證酶活性與酶量成正比。2 酶濃度 在反應條件一定時，酶濃度與反應速度成正比。按照中間產物學說，只有 s e 時，酶才能被底物分子飽和，反應速度才能達到最大...