1樓：
最好是做標準曲線,要看看擴增效率的.
調cdna就還了~
我是熒光定量pcr初學者，現在想做定量試驗，最近做了個標準曲線，可是內參和目的基因的點都不**上。
2樓：水行船
可以78℃讀板，這樣ct值就只是產物的值了，另外你的ntc可能是汙染了，稀釋的過程中也要防止汙染，尤其是標準品，
3樓：匿名使用者
從溶解曲線上看，確實有非特異性的擴增，在75度左右的小峰。樣本的濃度越低，這個非特異的干擾就越大。最好不要用sybr green做。改用探針吧
4樓：匿名使用者
qpcr手抖一下就好幾倍的差別甩出去的 啥樣的結果都挺正常 多做幾次取個最穩定的結果就行了
實時熒光定量pcr沒出現擴增曲線為什麼
5樓：匿名使用者
說明擴增失敗。常見原因如下：（1）定量試劑質量較差；（2）模板質量太差；（3）引物質量太差；（4）pcr擴增時反應程式的設定有問題。
請問做熒光定量pcr時每次都需要做標準曲線嗎？謝謝！
6樓：匿名使用者
絕對定量只要做一個就行。
相對定量：△△ct法，只用做一次，把目的基因和內參基因的斜率都調整到-3.32左右，兩者相差不超過0.
1，同時r2≥0.99。則之後就可以不用再做了。
不用，標準曲線法需要每次都做！
7樓：百浩生物
有時候感覺是說了廢法，當然是每次都做標準曲線結果更好了。不過如果你邊著做，並且樣品是同一批配的，這個影響不大，上一批的標準曲線可以用於下一批的。
怎麼判斷實時熒光定量pcr標準曲線是否準確
8樓：匿名使用者
看標準曲線是否反映出了標準物質的真實濃度
實時熒光絕對定量pcr實驗資料分析哪個指標啊？
9樓：匿名使用者
ct,是從基線到指數增長的拐點所對應的迴圈次數，儀器中給出的ct就是你每個孔實際的ct值
ct mean,是你相同樣品的幾個重複的ct值得平均值如果是做的相對定量，用ctmean的結果就可以了，計算方法就是r＝2-δδct，現在很多儀器你只要設定的時候明確標出內參基因和目的基因，這個結果也是會有自帶軟體給計算出來的。
如果你是做絕對定量，那更方便，你只要在儀器設定的時候把你的標準品含量依次輸入，最後軟體會自動生成標準曲線什麼的，你最後只要分析og sq的結果就可以了。
10樓：匿名使用者
一般是分析他的ct，
如果是相對定量的話就是根據各樣品的ct值分析表達量的差異，
絕對定量的話就再看它的定量值，就是拷貝數
實時熒光絕對定量PCR實驗資料分析哪個指標啊
ct,是從基線到指數增長的拐點所對應的迴圈次數，儀器中給出的ct就是你每個孔實際的ct值 ct mean,是你相同樣品的幾個重複的ct值得平均值如果是做的相對定量，用ctmean的結果就可以了，計算方法就是r 2 ct，現在很多儀器你只要設定的時候明確標出內參基因和目的基因，這個結果也是會有自帶軟體...
實時熒光定量PCR擴增actin溶解曲線怎麼兩個峰
兩個峰長什麼樣？是挨在一起的還是離的很遠的？縱座標最高峰是多少？是同一個峰出現一個小缺口的樣子嗎？如果可以請將原圖傳上 誰能具體解釋一下熒光定量pcr中溶解曲線的意思以及作用 溶解曲線分析可以用來確定不同的反應產物，包括非特異性產物。溶解曲線分析可以用來確定不同的反應產物，包括非特異性產物。擴增反應...
我的乙型肝炎病毒定量,實時熒光定量PCR,結果991E
樓主你好 bai 你的病毒數量略微偏高du 若肝功能正常zhi則不建議 dao使用抗病毒 回,效果不會好,而且答容易發生耐藥 不知兩對半結果如何?但可以大概判斷的是你現在處於免疫耐受狀態,即你自己的免疫力並未對乙肝病毒產生攻擊,因此肝功正常。所以建議使用免疫調節 激發和調動免疫功能,同時定期複查肝功...