1樓:南京金益柏生物科技****
知道你用的方法是自己建立的,還是試劑盒?就檢測結果來說,確實有些問題。本底很高,很難看出效價是多少。
一般空白值和陰性不高於0.2,最好控制在0.1以內,陽性對照1.
0左右。如果只是粗略的估計一下,按p/n>2來計算即刻測出效價(試劑盒按盒中的方法來計算)。陽性、陰性、空白對照不需要做這麼多的,每個做兩孔取平均就可以了。
如果顏色與檢測有明顯出入,考慮是不是酶標儀有問題,可以整板檢測水與有色的底物液看看孔與孔之間的值是否有差異。
此外還可以用瓊擴法來檢測抗體效價。
求助elisa測定抗體效價方法
2樓:南京金益柏生物科技****
我用的是間接elisa,以下copy自我的畢業**:
將抗原用包被液稀釋至約10 ?g/ml;分別將陽性血清和陰性血清用tbs倍比稀釋,稀釋梯度從1:200,1:
400至1:204800,二抗用的是hrp標記的羊抗兔igg(1:5000稀釋) 。
酶標儀測定450nm處各個孔的吸光度(a450),計算陽性血清與陰性血清的吸光度之比(p/n),當p/n<1.5時為陰性,當p/n≥1.5而<2.
1為可疑,當p/n≥2.1為陽性,將p/n≥2.1時所對應的抗體最高稀釋倍數作為抗體的效價。
哪位高手知道用elisa測抗體效價怎樣計算
3樓:南京金益柏生物科技****
在excel沒找到直接積分的公式(如有其他人找到請指教一下)。我採用這種方法來計算。假設有六點(x0,y0),(x1,y1),(x2,y2),(x3,y3)(x4,y4),(x5,y5);您可以如下操作:
計算x0*y0/2;(x1-x0)*(y1-y0)/2,(x2-x1)*(y2-y1)/2,(x3-x2)*(y3-y2)/2;(x4-x3)*(y4-y3)/2;(x5-x4)*(y5-y4)/2。(你可以用excel的拷貝功能計算);然後加和該六個值,即為您想要的面積積分(類似值)。
請教:如何用elisa評價抗血清的效價
4樓:南京金益柏生物科技****
對照血清可形成梯度,是因為對照血清與包板的抗原量在所檢測的範圍內呈線性;待檢血清不呈線性,最有可能就是該血清與包板的抗原量不匹配。
請問elisa,所檢測一抗的效價怎麼求,我的實驗資料是1-6號為陽性,每次稀釋成之前的1|2
5樓:匿名使用者
記錄結果有下列幾種方法:
1、「+」或「-」:所有超過規定的o.d值(如o.
d,0.4)的標本均屬陽性,此規定o.d值是根據事先測定大量陰性標本所取得的,此規定值是陰性標本的上限。
或者以一組陰性標本o.d平均值加2~3個標準差作為陽性閾值。
2、直接以o.d值來表示,如0.4、0.7、1.2,o.d值越大,陽性反應越強,但此數值是在固定實驗條件下得到的結果,而且每次實驗都要有參考標本作對照。
3、以終點滴度表示:將標本作連續稀釋,最高稀釋度能出現陽性反應者(即od值仍大於陽性閾值,即為該標本的滴度。
4、以「比值」表示:求出被檢標本的o.d值與一組陰性標本o.
d值的比值,例如為陰性標本的2倍或3倍,即為陽性,比值小於2.1而大於1.5為可疑,<1.
5為陰性。
測定標本o.d值-空白o.d值
—————————————≥2.1
陰性對照o.d值-空白o.d值
如在此測定時以空白校正「o」點。
5、以「單位」來表示:在測定被檢標本的同時,再測定一個含已知單位數的陽性參考血清,用不同稀釋度作elisa檢測後,以o.d值為縱座標,單位數為橫座標,畫出標準曲線。
以後可根據被檢標本的o.d值,從曲線上找出相應的單位數,再乘於血清的稀釋倍數,即可得出被檢標本的單位數。
作試驗時的陰性參考血清最好不要顯色,否則會對結果判斷帶來困難,特別在目測時,當陽性標本o.d值》2.0時,應作適當稀釋後再作測定。
如何用elisa評價抗血清的效價
6樓:
抗血清bai的效價一般是指生物活性,du而zhi抗血清的生物活性dao
(比活性)很不穩定專。所以一般只能通過生屬物活性的方法來評價。elisa法評價抗血清效價的前提是要證明不同抗血清的結合活性同生物活性有線性關係。總之我認為elisa不太適合。
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