1樓：伊喜
現在一般用的都是pcr儀直接進行擴增的，所以你只需要做好擴前準備就ok啦！
按照試劑說明書把taq酶、buffer、引物、模版和水按順序加進ep管，不夠的用水補齊，加時一定要注意全部加進去了，因為量非常小，有一點不正確都會引起很大的改變~然後滴上石蠟、離心，再用槍頭取出混勻了的放入pcr儀跑程式就可以了。還有就是一定要注意要在冰上進行···
2樓：匿名使用者
pcr反應體系為：
dntp（ mmol/l） μl
taq polymerase（2 u/μl） μl引物і（forward） μl
引物п（reverse） μl
10×buffer μl
dna模板 μl
補ddh2o至總體積 25 μl
pcr擴增反應程式為：2-4步驟約30迴圈1、預變性 94 ℃ 4 min
2、變性 94 ℃ 30 s
3、退火 55 ℃溫度根據引物設定 30 s4、延伸 72 ℃ 2 min取決於目的產物的大小。
5、總延伸 72 ℃ 8 min
6、停止 4 ℃
3樓：zz筱箬
pcr就按照你pcr試劑說明把taq酶、buffer、引物、模版和水加進ep管，混勻放pcr儀裡跑程式就行了。
4樓：王偉英
做pcr每一步都很重要，但是關鍵在於引物和退火溫度。
pcr的應用
5樓：是嘛
用於**感染性疾病，腫瘤及遺傳病。感染性疾病，pcr在醫學檢驗學中最有價值的應用領域就是對感染性疾病的診斷。pcr對病原體的檢測解決了免疫學檢測的「視窗期」問題，可判斷疾病是否處於隱性或亞臨床狀態。
腫瘤，癌基因的表達增加和突變，在許多腫瘤早期和良性的階段就可出現。pcr技術能準確檢測癌基因的表達量，可據此進行腫瘤早期診斷、分型、分期和預後判斷；
遺傳病，pcr技術首次臨床應用是檢測鐮狀細胞和β-地中海貧血的基因突變。用fq-pcr檢測各種珠蛋白基因表達差異，是地中海貧血診斷的有效手段。
6樓：網友
1、核bai酸的基礎研究：基因組轉殖du
2、不對稱pcr製備單鏈dna用於zhidna測序3、反向pcr測定未dao知dna區域。
4、反轉錄回pcr（rt-pcr）用於檢測細胞中基因表答達水平、rna病毒量以及直接轉殖特定基因的cdna
5、螢光定量pcr用於對pcr產物即時監控6、cdna末端快速擴增技術。
7、檢測基因的表達。
8、醫學應用：檢測細菌、病毒類疾病；診斷遺傳疾病；診斷腫瘤；應用於法醫物證學。
pcr原理三個基本步驟常見的pcr技術？
7樓：羿元冬鹹乾
pcr技術（聚合酶鏈式反應）由變性--退火（復性）--延伸三個基本反應步驟構成：
模板dna的變性：模板dna經加熱至94℃左右一定時間後，使模板dna雙鏈或經pcr擴增形成的雙鏈dna解離，使之成為單鏈，以便它與引物結合，為下輪反應作準備；
模板dna與引物的退火（復性）：模板dna經加熱變性成單鏈後，溫度降至40~60℃左右，引物與模板dna單鏈的互補序列配對結合；
引物的延伸：dna模板--引物結合物在dna聚合酶的作用下，於72℃左右，以dntp為反應原料，靶序列為模板，按鹼基配對與半保留複製原理，合成一條新的與模板dna鏈互補的半保留複製鏈。重複迴圈變性--退火--延伸三過程，就可獲得更多的「半保留複製鏈」，而且這種新鏈又可成為下次迴圈的模板。
每完成乙個迴圈需2～4分鐘，2～3小時就能將待擴目的基因擴增放大幾百萬倍。
關於pcr產物的理解
8樓：andrew在上班
pcr有兩種解釋：
1：rt 是」逆轉錄「這項技術橡扮使用的」逆轉錄酶「來自逆轉錄病毒，是一種能按照鹼基互補配對原則，以脫氧核糖核苷酸為底物，以寡居dt為引物，把mrna轉換成相應dna的酶，由於該酶的效果與中心法則順序相反，故而有」逆轉錄「之稱。
2：rt是」即時「細胞瞬時轉錄的mrna種類頗多，各種mrna含量也有即時的改變，這梁則灶反映了細胞核內轉錄因子根據環境要求在做出相應的變化，realtime-pcr就應運而生。
原理：利用pcr高度的特異性，通過特定的引物能在複雜樣品中得到的特定序列的dna，而這種特定dna的產量跟反應初始階段模板量是直接相關的盯胡。
pcr技術具體的過程
9樓：提分一百
pcr的一般過程是什麼。
10樓：沙漠_熱風
變性--退火（復性）--延伸。
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