1樓：匿名使用者
或許樓主可以試試rfect的操作步驟，本說明書適用於24孔培養板的轉染實驗，其他規格的培養板的用量參照下面**，**給出的是每孔的用量與體積。a. 細胞接種：
轉染前一天接種細胞，每孔 500 μl 培養基（不可加抗生素），使細胞在轉染時密度在30-40% 。b. sirna-rfectsp混合物準備：
1. 6pmol sirna 用50μl無血清培養基稀釋。2.
2μl rfectsp用50μl無血清培養基稀釋。輕輕混勻，室溫孵育5min。注意：
確保在25 min內執行第三步操作，不要過於延遲。3. 孵育5min後，將sirna 稀釋液與rfectmn稀釋液混合（總體積100μl）。
輕輕混勻，室溫孵育20 將混合物加到培養的細胞內（完全培養基培養）：1. 將100μl混合物加入培養孔內，培養孔內含有培養的細胞。
輕輕晃動培養板5min，混勻。2. 37°c培養48-72h，檢測基因抑制效果。
如果需要，細胞培養4-6h時可以更換培養基，但不是必須。孵育時間的長短，取決於細胞型別、所幹擾基因本身及分析方法。可設定不同的孵育時間進行實驗以確定最佳孵育時間。
2樓：塵埃之裡
慢病毒轉染細胞的操作步驟如下：
1、慢病毒轉染前18-24小時，將貼壁細胞以1×10^5/孔鋪到24孔板中。使細胞在慢病毒轉染時的數量為2×10^5/孔左右。
2、第二天，用含有6 μg/ml polybrene的2ml新鮮培養基替換原培養基，加入適量病毒懸液。37℃孵育。
3、(對polybrene毒性敏感的細胞選作此步驟)4小時後加入2ml新鮮培養基以稀釋polybrene。
4、繼續培養24小時，用新鮮培養基替換含有病毒的培養基。
5、繼續培養。如果慢病毒含有螢光蛋白，一般轉染48小時後可見明顯螢光表達，72小時後更加明顯。如需facs檢測轉染效率，可在轉染後72-96小時進行。
如果慢病毒含有抗性基因並且需要加藥篩選，可以在轉染3-4天后開始加藥。
二、慢病毒轉染懸浮細胞實驗方法。
1、在2×10^5/ml懸浮細胞中加入polybrene至6 μg/ml和適量病毒，充分混勻。37℃孵育。或者150g室溫離心4小時(選作，部分難轉染的細胞系採用此步驟可以提高轉染效率)。
2、(對polybrene毒性敏感的細胞選作此步驟)4小時後(或離心結束後)加入等體積新鮮培養基以稀釋polybrene。
3、繼續培養3-4天。中間視細胞生長情況可傳代或換液。
怎樣提高情商，怎樣提高情商？
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怎樣提高情商，怎樣才能提高情商？
只要明白情商是一種處理情緒的能力，有目的的進行訓練就可以快速提高自己的情商。你可以通過以下2點來提高自己的情商 1注意觀察，在運用了之後，一定要仔細觀察別人的反應，看是否和我們期待的一樣，在多次運用以後，如果沒用，就要想一想是否是我們使用的方法不對。2多讀書，首先我們必須使自己的腦袋先充實起來，也就...