1樓：土豆燉排骨
液相色譜中影響色譜峰擴充套件的因素有：樣品池體積、連線管體積、時間常數（包括放大器及記錄儀的時間常數）等。樣品池體積大，使樣品被流動相稀釋，不僅會降低檢測靈敏度，還使峰展寬。
池的結構特點（幾何形狀）和池內的流動特性（從連線管到樣品池由於直徑變化引起的）都會影響峰展寬。 連線管對色譜峰擴充套件的影響，是由於流動相在空管中的流動速度分佈的縱斷面呈拋物線狀，管中心的樣品分子比管壁部分的樣品分子先到達樣品池，而樣品分子在液體中的徑向擴散很慢，因此引起了峰擴充套件。檢測器的時間常數包括檢測器感測器和電子元件的響應時間，感測器的響應較快，而檢測器放大器和記錄儀的時間常數有可能過大，使色譜峰變形失真，導致柱效下降，也影響色譜分析的可靠性和準確性。
裝置的情況也會影響色譜峰擴充套件，如：
一、液相色譜放置平穩牢固。
二、液相色譜有可靠的接地。
三、高壓氣瓶要放置在陰涼、通風處，通過減壓閥和機器連線。
四、使用氫火焰時，應先開助燃氣，後開氫氣，關閉時應先關氫氣，後關助燃氣。注意氫瓶、減壓 閥、連線管線是否洩漏。
五、溫控裝置，壓力錶應按規定進行檢定。
色譜法也叫層析法，它是一種高效能的物理分離技術，將它用於分析化學並配合適當的檢測手段，就成為色譜分析法。色譜法的最早應用是用於分離植物色素，其方法是這樣的:在一玻璃管中放入碳酸鈣，將含有植物色素(植物葉的提取液)的石油醚倒入管中。
此時，玻璃管的上端立即出現幾種顏色的混合譜帶。然後用純石油醚沖洗，隨著石油醚的加入，譜帶不斷地向下移動，並逐漸分開成幾個不同顏色的譜帶，繼續沖洗就可分別接得各種顏色的色素，並可分別進行鑑定。色譜法也由此而得名。
但其分離的原理仍然是一樣的。仍然叫它色譜分析。
由以上方法可知，在色譜法中存在兩相，一相是固定不動的，把它叫做固定相;另一相則不斷流過固定相，把它叫做流動相。
色譜法的分離原理就是利用待分離的各種物質在兩相中的分配係數、吸附能力等親和能力的不同來進行分離的。
使用外力使含有樣品的流動相(氣體、液體)通過一固定於柱中或平板上、與流動相互不相溶的固定相表面。當流動相中攜帶的混合物流經固定相時，混合物中的各組分與固定相發生相互作用。
由於混合物中各組分在性質和結構上的差異，與固定相之間產生的作用力的大小、強弱不同，隨著流動相的移動，混合物在兩相間經過反覆多次的分配平衡，使得各組分被固定相保留的時間不同，從而按一定次序由固定相中先後流出。與適當的柱後檢測方法結合，實現混合物中各組分的分離與檢測。
色譜分析法有很多種類，從不同的角度出發可以有不同的分類方法。
從兩相的狀態分類:
色譜法中，流動相可以是氣體，也可以是液體，由此可分為氣相色譜法(gc)和液相色譜法(lc)。固定相既可以是固體，也可以是塗在固體上的液體，由此又可將氣相色譜法和液相色譜法分為氣-液色譜、氣-固色譜、液-固色譜、液-液色譜。
另外，還有一種超臨界流體色譜法(supercritical fluid chromatography sfc)，超臨界流體色譜是值用超臨界流體做流通相，以固體吸附劑(如矽膠)或鍵合到載體(或毛細管壁)上的高聚物為固定相的色譜法。超臨界流體是在高於臨界壓力和臨界溫度時的一種物質狀態，它既不是氣體也不是液體，但兼有氣體和液體的某些性質。
高效液相色譜法(hplc)是繼氣相色譜之後，70年代初期發展起來的一種以液體做流動相的新色譜技術。高效液相色譜是在氣相色譜和經典色譜的基礎上發展起來的。現代液相色譜和經典液相色譜沒有本質的區別。
不同點僅僅是現代液相色譜比經典液相色譜有較高的效率和實現了自動化 操作。經典的液相色譜法，流動相在常壓下輸送，所用的固定相柱效低，分析週期長。而現代液相色譜法引用了氣相色譜的理論，流動相改為高壓輸送;色譜柱是以特殊的方法用小粒徑的填料填充而成，從而使柱效大大高於經典液相色譜(每米塔板數可達幾萬或幾十萬);同時柱後連有高靈敏度的檢測器，可對流出物進行連續檢測。
因此，高效液相色譜具有分析速度快、分離效能高、自動化等特點。所以稱它為高壓、高速、高效或現代液相色譜法。
hplc檢查藥物中有關物質的方法通常有哪幾種型別
2樓：匿名使用者
歸一化法，校正歸一化法，外標法（已知雜質）
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