1樓:匿名使用者
簡單來說bai是非特異性擴增,一個pcr反反du應體系的zhi
是有限的,大多數引物用dao於擴增目的回基因,匹配度高答
,容易結合,因此擴增快,條帶也就亮。而非特異擴增,匹配度不高,給合不穩定,因此擴出來的非特異帶顯得弱,而且通過有多條弱帶產生。
2樓:匿名使用者
非單克隆 或者引物可以從載體上p出部分片段
3樓:匿名使用者
建議:迴圈次數減少3,mg離子濃度降低到1.2mm,提高annealing的溫度
菌落pcr檢測有條帶,但是測序結果根本沒有連上,是什麼原因
4樓:匿名使用者
菌落baipcr的假陽性很多,也有du很多原因,所以一zhi般都是需要測序結果佐證的。
dao1,引物設計不合適專:選擇的擴增屬序列與非目的擴增序列有同源性,因而在進行 pcr 擴增時,擴增出的 pcr 產物為非目的性的序列。靶序列太短或引物太短,容易出現假陽性。
需重新設計引物。
2,靶序列或擴增產物的交叉汙染:這種汙染有兩種原因:一是整個基因組或大片段的交叉汙染,導致假陽性。
這種假陽性可用以下方法解決:操作時應小心輕柔,防止將靶序列吸入加樣槍內或濺出離心管外。除酶及不能耐高溫的物質外,所有試劑或器材均應高壓消毒。
所用離心管及樣進槍頭等均應一次性使用。必要時,在加標本前,反應管和試劑用紫外線照射,以破壞存在的核酸。二是空氣中的小片段核酸汙染,這些小片段比靶序列短,但有一定的同源性。
可互相拼接,與引物互補後,可擴增出 pcr 產物,而導致假陽性的產生,可用巢式 pcr 方法來減輕或消除。
菌液pcr的時候能p出目的條帶,為什麼測序卻完全不正確
5樓:v永遠拼搏
有可能是引物特異性不好或者細菌細胞雜質所帶來的假陽性~得到的條帶有可能是混合的~建議測序分析模板用提取的核酸做模板......若還是不對 請重新設計引物 或採用巢式pcr
利用PCR擴增目的基因，那是和目的基因有關嗎
pcr合成的時候當然不只是需要引物，模板鏈也就是目的基因片段是必須的。因為dna聚合酶合成dna時只能從一段已有的dn 段往上加脫氧核苷酸延伸子鏈，而不能從頭合成，所以需要一段引物。引物就是目的基因在5 段的一小段序列，在於模板鏈結合後，taq酶對其延伸完成複製。所以說模板不僅僅是和目的基因有關，應...
pcr技術擴增目的基因，所用引物個數與擴增次數的關係
引物本來就是單鏈的。書上畫成雙鏈才怪。pcr所用的dna聚合酶只能順著已經存在的一小段dna的尾巴來接著合成，它不會自己起頭。引物就是這麼一小段用來起頭的dna。dna本身很長很長，我們擴增時，只能擴增其中一小段基因。如何確定擴增哪一小段呢？就需要引物來幫忙了。引物具有特殊的核苷酸序列，使它正好能與...
怎麼用工具檢測記憶體條好壞，如何檢測記憶體條好壞的方法
如果是說 壞,那是檢測不出來的,軟體還沒有發展那一水平.但是如果說是效能的好壞,這就沒有什麼可檢測的意義了,因為在買記憶體條的時候,商家都會把記憶體條的所有引數說出來的,就算沒問也沒說.這裡有一篇如何在 windows 下檢測記憶體好壞的軟體，非常實用 http jingyan.如何檢測記憶體條好壞...