用流式細胞儀檢測細胞週期,觀察哪些指標可以反應增殖,觀察哪些

2021-04-18 07:57:07 字數 2434 閱讀 1424

1樓:匿名使用者

你這個試驗bai必須要用

dubrdu加pi來檢測。pause-chase抑制**,zhi如果dao是抑制了最後一步,就會回出現g2期的堆積,g1期減少。如果抑制的答是dna合成,就會出現brdu陽性細胞的減少

促進的藥物會發現各個時間點細胞週期的有變化。你最好貼個圖我給你分析一下

流式細胞儀檢測細胞週期dna含量結果圖怎樣分析和說明

2樓:緒白山錯韻

流式細胞儀進行dna定量:

用於**細胞週期,細胞固定後,加入pi等%bg梢越岷螪na的熒光染料。處於s1期的細胞有一個峰,s2期的細胞dna量多一倍,有另外一個峰。而s期的則位於2峰之間。

凋亡的細胞由於dna被降解,所以出現於第一個峰之前。

dna提取出來後就不能用流式檢測了

流式細胞儀檢測細胞週期圖怎麼看

3樓:匿名使用者

這個要根據是dna單染還是dna+核苷酸模擬物雙染來區別。你的圖呢?

流式細胞儀觀察細胞週期樣品怎樣準備

4樓:匿名使用者

根據你所購買的試劑盒而定,一般是先用70%乙醇先固定,然後加rna酶和pi,半個小時左右上內機檢測就可以了.需要注意容的就是加酒精固定的時候要用四度預冷的酒精,緩慢的加,邊加邊晃動細胞,避免細胞黏連在一起.

(1)細胞培養

取對數生長期的細胞,按1x106個/ml以1ml體積接種於6孔板內。培養24h後,加入不同濃度樣品。在37 ℃、5 % 的co2恆溫箱中培養24h後終止。

(2)細胞固定

胰酶消化並離心收集細胞(800rpm/min),棄上清,用預冷pbs洗細胞兩次,加入預冷70%乙醇, -20℃固定儲存。

(3) 細胞染色

離心收集細胞(800rpm/min),以1ml的pbs洗細胞一次,加入500ulpbs含50ug/ml溴化乙錠(pi),100ug/ml rnase a, 4℃避光孵育20分鐘。

(4)檢測

以標準程式用流式細胞儀檢測,汞激發波長488nm,計數8千個細胞,結果用軟體winmdi version 2.9分析。

流式細胞儀測細胞週期圖怎樣分析

5樓:瀟灑的熱心網友

(1)細胞

培養bai

取對數生長du

期的細胞,按1x106個/ml以1ml體積zhi接種dao於6孔板內

。培養24h後,加入版不權同濃度樣品。在37 ℃、5 % 的co2恆溫箱中培養24h後終止。

(2)細胞固定

胰酶消化並離心收集細胞(800rpm/min),棄上清,用預冷pbs洗細胞兩次,加入預冷70%乙醇, -20℃固定儲存。

(3) 細胞染色

離心收集細胞(800rpm/min),以1ml的pbs洗細胞一次,加入500ulpbs含50ug/ml溴化乙錠(pi),100ug/ml rnase a, 4℃避光孵育20分鐘。

(4)檢測

以標準程式用流式細胞儀檢測,汞激發波長488nm,計數8千個細胞,結果用軟體winmdi version 2.9分析。

生物化學實驗中,如何進行細胞週期的檢測呢?有什麼方法麼,謝謝回答!

6樓:山寨營

早期死亡細胞膜通透性狀態的不同是區分細胞凋亡和壞死的一個重要指標,凋亡細胞在進入最終溶解階段前,胞膜通透性無明顯改變,相對分子質量大的與dna結合的熒光染料(如pi)不能時入凋亡細胞內,而相對分子質量小的熒光染料(如hoechest 3342或33258等)仍能被細胞攝取。應用流式細胞儀或熒光顯微鏡可區分和壞死細胞,細胞內dna出現hoechest 3342標記而不出現pi標記的為凋亡細胞。

主要操作步驟如下:①組織塊用0.25%胰酶消化30min~1h。

②200~400目篩網過濾細胞,獲得單細胞懸液。③75%乙醇(-20℃預冷)固定細胞1h。④加入pi(終濃度50g/ml)和無dna酶汙染的rna酶(終濃度50g/ml)1ml染色30min~1h。

⑤流式細胞儀檢測細胞週期和凋亡

急求流式細胞儀檢測細胞週期和細胞凋亡的結果圖6張! 50

7樓:匿名使用者

你是要這些圖來偽造資料吧。我看還是老老實實的做實驗吧。細胞週期和凋亡用流式細胞儀做都很簡單,全部試驗1-2天就全部搞定了。

做研究還是要誠實為大

8樓:緣起緣滅

這沒什麼好參考bai價值的啊,你做不du

同的細胞出來的zhi**差異很大的,我做過dao

心臟和肝臟的,就內差別很大。容而且你做的染色和處理也是前提。一般凋亡小體是能看出來的,就是細胞周圍有一些很透明的小泡。

這是張網路上的圖。做流式細胞的單位並不多,很少會有人敢把圖給你的,除非是儀器公司的樣本圖

怎麼用流式細胞儀檢測hela細胞內的

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流式細胞儀檢測細胞凋亡結果該怎樣分析

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