1樓:匿名使用者
注意操作的一致性以及穩定性,一般情況下不同批次是有批間差的,但是實驗流程相對比較成熟的實驗室,或者老師批間差不會很大,我們實驗室要求相同樣本批間差在0.2cycle以內。建議你多做幾組重複。
pcr實驗室汙染了怎麼處理?
2樓:北京索萊寶科技****
出現汙染後,我們首先考慮可能是試劑的汙染,更換新批號的hbv試劑重新檢測後,結果仍為全部標本陽性。
將hbv標本拿到其他正規的pcr實驗室檢測,結果標本中陰、陽性結果都有,陰性對照是陰性,陽性對照是陽性,說明標本沒有被汙染將兩種批號的hbv試劑拿到其他正規的pcr實驗室檢測,也顯示試劑沒有問題。
我實驗室用消毒液擦拭工作臺面後,開啟所有的紫外燈照射一天,將所使用微量進樣器、離心管、槍頭、手套、記號筆、記錄本等都更換掉,再將hbv標本進行檢測,結果全部標本仍然為陽性。
用消毒液擦拭工作臺面後,開啟所有的紫外燈照射一天,將hbv標本重新檢測,同時設定了兩個陰性對照(a和b),a 陰性對照為將試劑的反應管從試劑盒中拿,開啟反應管的蓋子,在空氣中暴露10 min,蓋上蓋子,上機檢測;b陰性對照為將試劑的反應管從試劑盒中拿,不開蓋子,直接上機檢測。結果是全部標本和a陰性對照為陽性,而b陰性對照為陰性。
至此,雖然還查詢不到汙染源是什麼,但有一點可以肯定,pcr實驗室汙染是氣溶膠擴散而引起的後來經過調查,發現汙染是由於本室工一位工作人員在打掃實驗室衛生時,用擴增區的掃笤和拖把打掃了標本製備區的衛生引起。
在確定了汙染的原因後,我們就開始著手排除汙染,每天都開啟整個pcr 實驗室的門窗和排氣扇,讓整個實驗室通風,用消毒液擦拭整個pcr實驗室,開啟所有的紫外燈照射。
每隔3 d按3.5步驟檢測一次,一直這樣處理了一個月,a陰性對照才轉為陰性。連續檢測三次a和b陰性對照,每次結果都均為陰性,才確定pcr實驗室恢復正常。
通常我們對pcr實驗室汙染的預防是採取隔離不同操作區、分裝試劑、改進實驗操作等規則,對汙染的處理是用稀鹽酸擦拭或浸泡;紫外線照射法等 ]。而對於實驗室的通風方面沒有給予足夠的重視,為了防止實驗區間之間的相互汙染,各個實驗區間都是儘可能的密閉,從而使得實驗室出現pcr產物殘留汙染的機率增大。從本次pcr實驗室汙染排除的過程來看.我覺得汙染得以排除的一個關鍵是通風。
適當的給予實驗室通風,可起到空氣稀釋的作用,有利於pcr產物殘留量的減少,加快實驗室汙染的排除。
3樓:廣州雙螺旋基因技術****
a. 實驗室進行通風處理,至少2 周的時間;
通風可加速擴增產物的消散的速度
b. 使用清水對實驗檯面、實驗室進行清洗;
dna不溶於酒精,使用清水多次擦拭後可消除附在實驗檯面等的核酸dna;
c. 使用紫外燈進**間的照射;
紫外線及產生的臭氧都有破壞dna結構的作用d. 之前使用的滅菌鍋使用清水清洗多次,不要和耗材等在一起滅菌;
e. 可用1mol/l 的鹽酸對可疑器具或者實驗檯面進行浸泡或擦拭。
鹽酸可使dna脫嘌呤,破壞dna的結構。
f. 若有條件,選擇一個新的實驗環境進行檢測實驗最好。
4樓:南京金益柏生物科技****
用紫外燈照射實驗室用酒精擦洗儀器
PCR為什麼對標本的純度要求低,用來做PCR的標本有什麼要求
變性對pcr擴增來說bai相當重要,如du變性溫度低,zhi變性時間短,極有可dao能出現假專陰性 退火溫度過低,可致非屬特異性擴增而降低特異性擴增效率退火溫度過高影響引物與模板的結合而降低pcr擴增效率。有時還有必要用標準的溫度計,檢測一下擴增儀或水溶鍋內的變性 退火和延伸溫度,這也是pcr失敗的...
做夢人為什麼會做相同的夢,人為什麼會做相同的夢
古代的人說這個樣子好像代表什麼樣的預兆,其實不用這麼想,人的心理活動,在平時的時候實現不了,在夢裡,就被釋放出來,夢中夢,代表你心裡潛意識自己很強調,很看重的一件事,或者一段場景,一段記憶,你又不希望它發生在現實中,所以你在夢裡都告訴自己說,啊,這是在夢裡的,醒了就會沒事,放鬆心情,就會好了 追問 ...
為什麼我總是做傻事說傻話?每次想著這樣做對不對,明明想到會錯
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