鑑定蛋白質有哪些方法,蛋白質的鑑定方法?

2022-10-13 06:10:15 字數 2859 閱讀 3053

1樓:匿名使用者

蛋白質含量的測定:

1 凱氏定氮法

根據氮在蛋白質分子中含量恆定(平均佔16%),因此測定出樣品中氮的含量後,即可求出樣品中蛋白質含量。

2 雙縮脲法

3 福林-酚試劑法

福林-酚試劑包括兩種試劑:鹼性銅試劑,磷鉬酸及磷鎢酸的混合試劑。鹼性銅試劑與蛋白質產生雙縮脲反應。

這種被作用的蛋白質中的酚基(酪氨酸),在鹼性條件下易將磷鉬酸和磷鎢酸還原成藍色的鉬藍和鎢藍,所生成藍色的深淺,與蛋白質的含量成正比。在650nm和660nm波長下測定光吸收值,即可測定蛋白質含量。

4 紫外吸收法

酪氨酸,色氨酸在280nm處左右具有最大吸收。由於在各種蛋白質中這幾種氨基酸含量差別不大,所以280nm的吸收值與濃度呈正相關。可用於蛋白質濃度的測定。

2樓:戈墨徹春辛

方法:將蛋白質放在試管裡用酒精燈加熱或放入酸or鹼。(硫酸除外,因為硫酸會使蛋白質碳化)

現象:有沉澱生成

多給點分啊!純手打

3樓:我服了

最簡單的,燃燒法,有蛋白質的和沒有的馬上就能分辨出來。

4樓:匿名使用者

在生物學上有顯色反應,用雙縮脲試劑鑑別蛋白質。

具體方法是:

先將雙縮脲試劑a加入組織樣液,振盪均勻(必須營造鹼性環境),再加入雙縮脲試劑b,搖盪均勻。如果組織裡含有蛋白質,那麼會看到溶液變成紫色。具有兩個或兩個以上肽鍵的化合物皆可與雙縮脲試劑產生紫色反應。

蛋白質的肽鍵在鹼性溶液中能與cu2+絡合成紫紅色的化合物。顏色深淺與蛋白質濃度成正比。

蛋白質的鑑定方法?

5樓:

1.最簡單的方法,也是人們最耳熟能詳的方法,就是對物體進行灼燒,看是否能問到燒焦的羽毛味,如果可以問到燒焦的羽毛味,那麼證明有蛋白質的存在。

2.中學的化學課上也教過我們不少的方法,比如說吧蛋白質和濃hno3進行反應,如果能夠變性產生黃色不溶性物質,那麼該物體是蛋白質。

3.還有一種方法就是把含有蛋白質的屋子磨成漿然後過濾,取濾液進行測試,可以先在濾液中加氫氧化鈉(naoh),然後再加入雙縮脲試劑,如果出現紫色反應,就為蛋白質。

如何鑑定蛋白質

6樓:匿名使用者

用雙縮脲試劑

雙縮脲試劑(biuret reagent)是由雙縮脲試劑a(naoh)和雙縮脲試劑b(cuso4)兩種試劑組成.

雙縮脲試劑a的成分是氫氧化鈉的質量分數為0.1 g/ml的水溶液;

雙縮脲試劑b的成分是硫酸銅的質量分數為0.01 g/ml的水溶液。

雙縮脲試劑可以驗證蛋白質的存在。

具體方法是:

先將雙縮脲試劑a加入組織樣液,振盪均勻(必須營造鹼性環境),再加入雙縮脲試劑b,搖盪均勻。如果組織裡含有蛋白質,那麼會看到溶液變成紫色。具有兩個或兩個以上肽鍵的化合物皆可與雙縮脲試劑產生紫色反應。

蛋白質的肽鍵在鹼性溶液中能與cu2+絡合成紫紅色的化合物。顏色深淺與蛋白質濃度成正比。

雙縮脲(nh2conhconh2)是兩個分子脲經180℃左右加熱,放出一個分子氨後得到的產物。

雙縮脲試劑本是用來檢測雙縮脲,因蛋白質中也有-conh-基也可用於檢驗蛋白質,與蛋白質接觸後的顏色呈紫色

7樓:囧口_口囧

雙縮脲反應產物雙縮脲結構雙縮脲試劑是由雙縮脲試劑a和雙縮脲試劑b兩種試劑組成. 雙縮脲試劑a的成分是氫氧化鈉的質量分數為0.1 g/ml的水溶液; 雙縮脲試劑b的成分是硫酸銅的質量分數為0.

01 g/ml的水溶液。 雙縮脲試劑可以驗證蛋白質的存在。 具體方法是:

先將雙縮脲試劑a加入組織樣液,搖盪均勻(必須營造鹼性環境),再加入雙縮脲試劑b,搖盪均勻。如果組織裡含有蛋白質,那麼會看到溶液變成紫色。具有兩個或兩個以上肽鍵的化合物皆可與雙縮脲試劑產生紫色反應。

蛋白質的肽鍵在鹼性溶液中能與cu2+絡合成紫紅色的化合物。顏色深淺與蛋白質濃度成正比。 雙縮脲(nh2conhconh2)是兩個分子脲經180℃左右加熱,放出一個分子氨後得到的產物。

雙縮脲試劑本是用來檢測雙縮脲,因蛋白質中也有-conh-基也可用於檢驗蛋白質,與蛋白質接觸後的顏色呈紫色。

**百科

鑑別蛋白質的方法有哪些

8樓:封琴瑟煙雨冢

常見的蛋白質鑑定方法有:

一、最簡單的方法就是對所要鑑定的物體進行灼燒二、使用化學藥劑進行化學反應來鑑定蛋白質

三、較為精準的方法是使用儀器進行蛋白質鑑定,如質譜儀等在生物學研究中經常會遇到一些關於蛋白質鑑定的問題,如單一蛋白質或者簡單混合物的鑑定;對單一蛋白質的序列分析等。這一類蛋白質鑑定,在精密度上要求較高,所以幾乎都是採用質譜儀器,來對蛋白質進行精密鑑定。

質譜技術是鑑定蛋白質的其中一種平臺技術。可用到的質譜儀有thermo fisher的q exactive質譜儀,ltq orbitrap velos質譜儀,以及ab sciex的6500 q trap質譜儀。所在鑑定機構的不同,在硬體品牌的使用上也會有不同。

蛋白質鑑定的流程一般分三大步:蛋白質提取、純化、鑑定。這個流程是一個將蛋白質層層「解剖」的過程,從中我們可以對蛋白分子量進行測定,蛋白膠點、膠條、ip樣品蛋白質進行鑑定,非變性質譜分析以及pull-down靶蛋白質譜鑑定等,較為細緻的去分析蛋白質中的各種物質、性質等。

9樓:匿名使用者

1.灼燒產生燒焦羽毛的氣味是蛋白質.

2.遇濃hno3變性產生黃色不溶物是蛋白質.

3.磨漿過濾,取濾液,先加naoh,再加入雙縮脲試劑,出現紫色反應,就為蛋白質.

簡述蛋白質分離純化與鑑定的主要方法有哪些?其特點是什麼?

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