流式細胞術實驗步驟是什麼？
1樓：帳號已登出
流式細胞術實驗：
1、製備細胞懸液，計數。
2、分裝，按照每個ep（運差汪管1-2*10 6個細胞分裝，3500rpm，4度離心。
3、用100ulpbs重懸，加入10ul大鼠血清封閉，4度避光30min。
4、加入相應的螢光標記的抗體，混勻，避光，4度孵旁仔育30min。
5、加入1mlpbs洗兩遍。
6、用200ul pbs重懸，經紗布過濾轉至流式管，上級檢測。
細胞或者大小接近的顆粒物質都可以檢測。
樣本通過鞘液的輸送，成單個佇列依次通過雷射束。
樣本事先可以根據檢測需要被螢光標記，通慶桐過雷射束的時候就會得到螢光訊號，被記錄下來。可以同時標記不同的螢光標記做不同的檢查。優點就是可以在短時間內檢測大量的樣本（每秒幾千個到幾萬個細胞）。
主要應用於各種生物醫學研究和臨床診斷。國際上通用的白細胞。
和淋巴瘤的診斷標準就是靠流式細胞儀。
的分型來確定的。
以上內容參考：百科-流式細胞術。
流式細胞術的用途是什麼
2樓：網友
細胞或者其他顆粒狀的物體可以被螢光標記的抗體或者替他螢光染料染色。當這些被標記的物體通過流式細胞儀的時候，雷射照射，得到不同的激發光。
用途：1. 臨床診斷：比如白血病，淋巴瘤的分型，可以指導**。檢測幹細胞的百分率，可以判斷幹細胞**的效果等等。
2. 實驗研究。根據前面所說的原理。只要可以被染色的，都可以用流式來分析。可以檢查各種抗原的含量。代謝狀態等等。
3. 細胞的分選。最後，根據染色的狀態，可以把不同的細胞篩選出來，進行下一步的研究。
流式細胞術原理
3樓：杏仁小餅乾啊橙
流式細胞術工作原理是在細胞分子水平上通過單轉殖抗體對單個細胞或其他生物粒子進行多引數、快速的定量分析。它可以高速分析上萬個細胞，並能同時從乙個細胞中測得多個引數，具有速度快、精度高、準確性好的優點，是當代最先進的細胞定量分析技術之一。
光源、液流通路、訊號檢測傳輸和資料的分析系統是流式細胞儀的主要組成。臨床中運用流式細胞儀進行外周血白細胞、骨髓細胞以及腫瘤細胞等的檢測是臨床檢測的重要組成部分。
流式細胞技術（flow cytometry，fcm）是利用流式細胞儀進行的一種單細胞定量分析和分選技術。流式細胞術是單轉殖抗體及免疫細胞化學技術、雷射和電子電腦科學等高度發展及綜合利用的高技術產物。
基本結構：流式細胞儀由三部分構成：液流系統，包括流動室和液流驅動系統；光學系統，包括激發光源和光束收集系統；
電子系統，包括光電轉換器和資料處理系統。流式細胞儀的工作原理是使懸浮在液體中分散的經螢光標記的細胞或微粒逐個通過樣品池，同時由螢光探測器捕獲螢光訊號並轉換成分別代表前向散射角、側向散射角和不同螢光強度的電脈衝訊號，經計算機處理形成相應的點圖，直方圖和加三維結構影象進行分析。
用於fcm的樣本是單細胞懸液，可以是血液、懸浮細胞培養液、各種體液、新鮮實體瘤的單細胞懸液以及石蠟包埋組織的單細胞懸液等。
流式細胞術原理
4樓：黑科技
流式細胞術公開課。
會形成鞘液流（鞘液是為了保證細胞在中間形成單個排列的細胞流，因為要保證雷射覆蓋整個樣本中心流）在外周，樣本流在**的層流狀態，使得樣本僅在軸心。
雷射照射到樣本流上，雷射60um寬，20um高（寬高有限，只有樣本流剛好在中間才能保證雷射能覆蓋樣本流細胞）
樣本流中的細胞表面的螢光抗體受到雷射的照射以後，會被激發出螢光；
有兩個鏡頭接受螢光訊號，乙個是forward scatter-fsc檢測器（前向散射光），另乙個是side scatter-ssc側向軸檢測器/螢光訊號檢測器（與雷射90度）
收集到的光訊號就被光纖傳導到光分離系統中去了，光訊號手機系統的內圈是長通濾片。
中圈和外圈分別是帶通濾片和pmt（啥？）
剛才細胞經過雷射照射會有四個重疊的光譜，x軸是波長，y軸是強度。
第一步，通過長通濾片，光訊號被切割。
第二步，經過帶通濾片把特定波長的波過濾過來，不符合波長條件的波被反射。
第三步，經過過濾的波，經過pmt轉變成電訊號，pmt元件是電訊號檢測分析系統，左邊是光電轉換膜，上下兩邊有不同的小電極，側邊有電子檢測器，光訊號轉換成電訊號的過程：
光子打到左邊的光電轉換膜上---膜上就會蹦出乙個電子，這樣就初步實現了光訊號轉變成電訊號 --電訊號經過不同的電極就會** --電子經過**，電訊號實現級聯放大作用(通過調整電壓可以調整最終的電訊號大小) -檢測器上就會形成乙個電脈衝。
表示電脈衝有三個引數：
峰寬+高度+峰下面積a；
常規的一般用峰下面積a來表示。
下面是經過電訊號轉換的訊號強度值，反映了每個螢光訊號的強度；
每一行就是乙個細胞，每一行代表乙個細胞，每一列的數值784～10229代表每個特定的pmt的螢光訊號強度值；
兩個pmt作為橫縱座標，可以根據螢光強度判定這兩種螢光抗體結合細胞的比例；
乙個細胞在軸上就是乙個點，每乙個點就代表乙個細胞的位置，橫縱座標分別代表兩個通道pmt的強度（選取的兩個pmt）；
從下圖可以看到黑乎乎的一團代表一種細胞，但具體的數字並不知道，為了彌補這個缺點呢，就出現了密度圖。
細胞越多用不同的顏色（偽色）表示，可以看到紅色中心的細胞最多，外周細胞少。
把密度相等的點畫成一條線。
橫軸代表螢光訊號強度，縱軸代表細胞數量。
流式細胞術原理
5樓：一名優質博主
流式細胞術是利用流式細胞儀對於處在快速直線流動狀態中的細胞或生物顆粒同時進行多引數、快速定量分析和分選的高新技術。
其特點是：第一，只要樣本製備成單個細胞或生物顆粒懸液均可以分析。第二，測量速度快，每秒中可以測量數千個乃至數萬個細胞。
第三，同時測量每個細胞的多引數特徵。第四，在進行細胞特徵分析的同時可以把指定特徵的細胞分離出來，以便對特定細胞做進一步培養、轉殖化、觀察或進行某些實驗，這就是分選技術。
流式細胞術可以檢測細胞pdl1嗎
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請教,流式細胞圖應該怎麼看,流式細胞圖怎麼看？
從左到右，從上到下，第一個圖橫軸是fsc，縱軸是ssc，一個前向角，一個側向角，具體定義專就不說了，這兩個 屬指標主要用於判斷細胞的大小。利用這個圖可以去除細胞碎片以及粘連在一起的細胞，只挑單個細胞進行後續分析。你可以繼續問。不懂，流式細胞圖怎麼看？有兩種，一種散點圖，每一個點代表 一個細胞，如fs...
流式細胞怎麼把兩個樣品圖重疊,流式細胞儀直方圖分析怎麼做峰疊加圖，類似下圖。cellquestpro
看具體型號，有些機器自帶軟體有這個功能。第三方軟體，比如flowjo也可以實現 流式細胞儀 直方圖分析怎麼做峰疊加圖，類似下圖。cellquest pro 這個很簡單的，在選單中點plot，然後在下來選單中選中overlay，再選取要疊加的檔案就可以了 如何看流式細胞術結果中的圖 1 單引數直方圖 ...