1樓：阿魯巴星人
剛製作完成的時候，轉化率最高。
然後放入冰箱，只要凍融過，轉化率就會下降，並且隨著儲存時間的增加而下降。
製備出來的感受態細胞在什麼時候做轉化最佳
2樓：阿魯巴星人
當場做出來的，當時做轉化，轉化效率最高。
儲存在-80冰箱的感受態，儲存40天以後，感受態效率會有明顯下降。
經轉化的感受態細胞，塗完板後，還有剩餘的菌液，為什麼是放在-4度儲存，為什麼不能放在-20度？？
3樓：匿名使用者
是4度吧。。放4度是抑制其生長。。若放在-20度，雖然經過轉化後復甦，細胞是有些恢復了活性，但是畢竟還是很脆弱，-20度冷凍細胞，然後再解凍使用的話，很容易使細胞死亡的，加之如果本來細胞的轉化效率就不是很高的話，可能再次塗板的結果是沒有菌落長出。。。
一般，我們做實驗，剩餘對的菌液是不會再用的，一是不靠譜，二是若是塗的板沒長單菌落的話，那麼這個剩餘的菌液也就沒什麼作用了：若是長出了，大可以抽提質粒，下次用時再轉，或者搖菌後用甘油保種，下次用時可選擇劃線，也可以直接搖菌。。。
個人感覺那個剩餘的菌液，不存也罷。。不知道你那邊存起來時為了？？？
4樓：匿名使用者
為什麼要儲存？都塗上不就完了，如果轉化率較高，不必用離心，吸取200微升塗上就行了，轉化率低的時候離一下心倒掉上清留一兩百微升塗板。一般4度短時間儲存，-20度長期儲存。
菌液反覆凍融會影響菌種活力。如果一兩天內就要用還是放4度好。
感受態細胞為什麼要放倒-80度儲存
5樓：魔力
您好，感受態細胞收到過點選或者氯化鈣氯化銫等的處理，細胞壁以及細胞膜都有損傷，可以說是十分脆弱的細胞，如果放於-20℃儲存，時間長了細胞內部液化度較高的情況下，細胞會由於流動性的原因造成不可逆損傷，甚至死亡。所以要放於-80攝氏度。
6樓：匿名使用者
首先你要明白，凍存的細胞，溫度越低，儲存的時間越長，像哺乳類細胞凍-80儲存半年沒問題，但你如果要儲存一年以上，還是液氮更可靠
我不能說明為什麼要放-80，但我可以告訴你，放-20，時間一長，感受態轉化活性急劇下降，而且容易死掉。
7樓：匿名使用者
康體生命的感受態細胞都是-80度儲存的，dh5α，dh10β，stbl3，jm109，bl21(de3)，top10這些都是包乾冰、包運送的，平均下來一支只要3.5
感受態細胞的製備時有什麼注意事項
8樓：天寂無痕
1、培養溫度。較低的溫度培養有利於感受態的形成，這樣可以獲得較高的感受態，但太低又不實用，因而產生了 inoue 的高效感受態製備方法，它實際是利用了所有有利於感受態的文獻而得出的一
個非常理想方法。
2、在儲存感受態時，dmso 要比甘油的效果要好，它會使感受態的效率增加。
3、液氮速凍也會使感受態的效率提高，因此推薦用液氮速凍感受態，然後儲存於超低溫冰箱內。
4、凍存的感受態用一次拿一管，不要反覆凍融。化凍之後立即使用，不要冰上放太久。
5、操作時可以輕彈輕甩，儘量避免用移液器吹吸。
9樓：y神級第六人
（1）質粒dna的質量和濃度：
用於轉化的質粒dna應主要是超螺旋態的，轉化率與外源dna的濃度在一定範圍內成正比，但當加入的外源dna的量過多或體積過大時，則會使轉化率下降。一般地，dna溶液的體積不應超過感受態細胞體積的5%，1ng的cccdna即可使50ul的感受態細胞達到飽和。對於以質粒為載體的重組分子而言，分子量大的轉化效率低，實驗證明，大於30kb的重組質粒將很難進行轉化。
此外，重組dna分子的構型與轉化效率也密切相關，環狀重組質粒的轉化率較分子量相同的線性重組質粒高10~100倍，因此重組dna大都構成環狀雙螺旋分子。
（2）感受態細胞的質量：
所用的cacl2等試劑均需是最高純度的，並用最純淨的水配製，最好分裝儲存於4℃
（3）細胞的生長狀態和密度
最好從-70℃或-20℃甘油儲存的菌種中直接轉接用於製備感受態細胞的菌液。不要用已經過多次轉接，及貯存在4℃的培養菌液。細胞生長密度以每毫升培養液中的細胞數在5×107個左右為佳。
即應用對數期或對數生長前期的細菌，可通過測定培養液的od600控制。對tg1菌株，od600為0．5時，細胞密度在5×107個/ml左右。（應注意od600值與細胞數之間的關係隨菌株的不同而不同）。
密度過高或不足均會使轉化率下降。
（二）感受態細胞轉化中的影響：
整個操作過程均應在無菌條件下進行，所用器皿，如離心管，移液槍頭等最好是新的，並經高壓滅菌處理。所有的試劑都要滅菌，且注意防止被其它試劑、dna酶或雜dna所汙染，否則均會影響轉化效率或雜dna的轉入。整個操作均需在冰上進行，不能離開冰浴，否則細胞轉化率將會降低。
大腸桿菌感受態細胞製備時的CaCl2濃度到底是多少
1 質粒dna的質量和濃度 用於轉化的質粒dna應主要是超螺旋態的，轉化率與外源dna的濃度在一定範圍內成正比，但當加入的外源dna的量過多或體積過大時，則會使轉化率下降。一般地，dna溶液的體積不應超過感受態細胞體積的5 1ng的cccdna即可使50ul的感受態細胞達到飽和。對於以質粒為載體的重...
為什麼用氯化鈣製備感受態細胞,用氯化鈣怎樣製備新鮮的大腸桿菌感受態細胞？
鈣離子的作用是結合於細胞膜上，是細胞膜呈現一種液晶態。在冷熱變化刺激下液晶態的細胞膜表面會產生裂隙，使外源dna進入。大腸桿菌感受態細胞製備為什麼要用cacl2處理細菌 ca離子沉聚在細胞膜表面會使得細胞膜呈一種液晶的狀態，這種狀態便於在熱激條件下形成縫隙，便於轉化質粒。用氯化鈣怎樣製備新鮮的大腸桿...
各種感受態細胞的區別，用途和特徵
首先，這兩種菌的基因型不一樣，這就導致了這兩種菌有不同的用途 dh5a是用於克隆的，構建質粒，建庫，保藏質粒，等等，用的是它。bl21是專門用來表達蛋白的，如果用於儲存質粒，質粒會很不穩定。高中生物生物學理工學科 20 那個人回答的挺好，一個人產生的精子是有2的23次方種可能，人體內不止一個細胞形成...