1樓：匿名使用者
感受態細胞是指容易吸收質量的細菌，通常是某種大腸桿菌。
最重要的就是要注意不能反覆凍融，要放在-80度的冰箱中儲存，使用時要在冰上緩慢融化
2樓：魯
很容易吸收周圍的dna，注意ca2+的濃度，吸收dna時要要用緩衝液
感受態細胞有何特點？如何保證它的質量？
3樓：匿名使用者
特點：處於最適攝取和容納外來dna的生理狀態
cacl2法：
操作：1.將快速生長的大腸桿菌置於經低溫（0℃）預處理的低滲氯化鈣溶液中，便會造成細胞膨脹，細胞膜通透性發生變化，極易與外源dna相粘附並在細胞表面形成複合物。
2.此時，將該體系轉移到42℃下做短暫的熱刺激，外源dna就可能被細胞吸收。進入細胞的外源dna分子通過複製、表達，實現遺傳資訊的轉移，使受體細胞出現新的遺傳性狀。
3.將轉化後的細胞在選擇性培養基上培養，篩選出帶有外源dna分子的陽性克隆。
意義：將構建好的載體轉入感受態細胞進行表達，不僅可以檢驗重組載體是否構建成功，最主要的是感受態細胞作為重組載體的宿主可以進行後續實驗，如蛋白質表達純化等工作。
4樓：匿名使用者
感受態是指受體細胞最易接受外源dn**段並能實現轉化的一種生理狀態。它雖受遺傳控制，但表現差別很大。時間上：
有的在生長的指數期後期（s.pneumoniae）。出現在指數末期和穩定期（bacillus其中一種）；感受態細胞所佔比例和持續時間也不同。
外界環境因子如環腺甘酸及ca對感受態也有影響。
保證質量：查資料。必須要查大量的資料，你做什麼菌，就要查相關資料。
做研究生都是從查資料開始的。
關於製備感受態細胞的方法有固定的幾種。但並非完全適合。需要在原有的基礎上進行摸索。
感受態細胞的製備時有什麼注意事項
5樓：天寂無痕
1、培養溫度。較低的溫度培養有利於感受態的形成，這樣可以獲得較高的感受態，但太低又不實用，因而產生了 inoue 的高效感受態製備方法，它實際是利用了所有有利於感受態的文獻而得出的一
個非常理想方法。
2、在儲存感受態時，dmso 要比甘油的效果要好，它會使感受態的效率增加。
3、液氮速凍也會使感受態的效率提高，因此推薦用液氮速凍感受態，然後儲存於超低溫冰箱內。
4、凍存的感受態用一次拿一管，不要反覆凍融。化凍之後立即使用，不要冰上放太久。
5、操作時可以輕彈輕甩，儘量避免用移液器吹吸。
6樓：y神級第六人
（1）質粒dna的質量和濃度：
用於轉化的質粒dna應主要是超螺旋態的，轉化率與外源dna的濃度在一定範圍內成正比，但當加入的外源dna的量過多或體積過大時，則會使轉化率下降。一般地，dna溶液的體積不應超過感受態細胞體積的5%，1ng的cccdna即可使50ul的感受態細胞達到飽和。對於以質粒為載體的重組分子而言，分子量大的轉化效率低，實驗證明，大於30kb的重組質粒將很難進行轉化。
此外，重組dna分子的構型與轉化效率也密切相關，環狀重組質粒的轉化率較分子量相同的線性重組質粒高10~100倍，因此重組dna大都構成環狀雙螺旋分子。
（2）感受態細胞的質量：
所用的cacl2等試劑均需是最高純度的，並用最純淨的水配製，最好分裝儲存於4℃
（3）細胞的生長狀態和密度
最好從-70℃或-20℃甘油儲存的菌種中直接轉接用於製備感受態細胞的菌液。不要用已經過多次轉接，及貯存在4℃的培養菌液。細胞生長密度以每毫升培養液中的細胞數在5×107個左右為佳。
即應用對數期或對數生長前期的細菌，可通過測定培養液的od600控制。對tg1菌株，od600為0．5時，細胞密度在5×107個/ml左右。（應注意od600值與細胞數之間的關係隨菌株的不同而不同）。
密度過高或不足均會使轉化率下降。
（二）感受態細胞轉化中的影響：
整個操作過程均應在無菌條件下進行，所用器皿，如離心管，移液槍頭等最好是新的，並經高壓滅菌處理。所有的試劑都要滅菌，且注意防止被其它試劑、dna酶或雜dna所汙染，否則均會影響轉化效率或雜dna的轉入。整個操作均需在冰上進行，不能離開冰浴，否則細胞轉化率將會降低。
影響感受態細胞轉化效率的因素有哪些
7樓：匿名使用者
1.感受態細胞的質量，比如超級感受態比普通感受態轉化效率高很多；2.質粒濃度及質量，連線產物因為質粒濃度低，純度低轉化效率比純的質粒低很多；3.
轉化條件，如熱激冷激的溫度時間等；4.活化培養的條件，soc培養基優於lb培養基；5.塗布用的培養基及抗生素濃度等。
各種感受態細胞的區別，用途和特徵
首先，這兩種菌的基因型不一樣，這就導致了這兩種菌有不同的用途 dh5a是用於克隆的，構建質粒，建庫，保藏質粒，等等，用的是它。bl21是專門用來表達蛋白的，如果用於儲存質粒，質粒會很不穩定。高中生物生物學理工學科 20 那個人回答的挺好，一個人產生的精子是有2的23次方種可能，人體內不止一個細胞形成...
感受態細胞在什麼時候加甘油比較好
甘油就可以了,dmso是用來保護細胞這種比較嬌嫩的,大腸桿菌就用便宜一點的好了.有問題一起討論解決哦 大腸桿菌感受態細胞製備為什麼要加入甘油 加甘油的大腸桿菌感受態一般是用來電轉的吧，加甘油是為了保護大腸桿菌。在製備感受態細胞，儲存的時候用的甘油的濃度？以及加完甘油後最終的濃度？配製30 的甘油，儲...
為什麼製備好的感受態細胞放冰箱過夜後,轉化率會提高
剛製作完成的時候，轉化率最高。然後放入冰箱，只要凍融過，轉化率就會下降，並且隨著儲存時間的增加而下降。製備出來的感受態細胞在什麼時候做轉化最佳 當場做出來的，當時做轉化，轉化效率最高。儲存在 80冰箱的感受態，儲存40天以後，感受態效率會有明顯下降。經轉化的感受態細胞，塗完板後，還有剩餘的菌液，為什...