驗證感受態細胞轉化效率時為什麼用puc19質粒

1樓：阿魯巴星人

因為質粒小，好轉染

而且大家都用它，已經作為一個標準了

質粒轉化感受態細胞的原理是什麼（原理，感

2樓：匿名使用者

不對,通過轉化到感受態細菌

中,不是細胞.感受態的大腸桿菌,可以自己製作也可以通過購買.之後將細菌凃到含有抗生素的板子上,長出克隆後挑取單克隆,將單克隆加入含有抗生素的細菌培養基中培養,之後提取質粒,提取質粒可以購買相應的試劑盒,按照試劑盒的說明書操作即可.

質粒是帶有抗性基因的,只有含有該質粒的細菌才能在含有對應抗生素的培養基中存活並增殖,這樣就能確保是你的表達載體質粒.當然為了防止雜菌的汙染,整個過程中最好是無菌操作.而表達載體質粒有可能出現突變等情況,所以可以在提出質粒之後,取少量質粒送測序,來確保序列的無誤.

影響感受態細胞轉化效率的因素有哪些

3樓：匿名使用者

1.感受態細胞的質量，比如超級感受態比普通感受態轉化效率高很多；2.質粒濃度及質量，連線產物因為質粒濃度低，純度低轉化效率比純的質粒低很多；3.

轉化條件，如熱激冷激的溫度時間等；4.活化培養的條件，soc培養基優於lb培養基；5.塗布用的培養基及抗生素濃度等。