1樓:匿名使用者
質粒轉化時先在冰中放置半小時後再42度熱激的原因: 熱激法:大腸桿菌在0℃cacl2低滲溶液中,菌細胞膨脹成球形,轉化混合物中的dna形成抗dnase的羥基-鈣磷酸複合物粘附於細胞表面,經42℃短時間熱衝擊處理,促進細胞吸收dna複合物,在豐富培養基上生長數小時後,球狀細胞復原並**增殖。
在被轉化的細胞中,重組子基因得到表達,在選擇性培養基平板上可挑選所需的轉化子。所以,預先需要先在冰水中旋轉半小時。 也可以用電轉化法:
外加於細胞膜上的電場造成細胞膜的不穩定,形成電穿孔,不僅有利於離子和水進入細菌細胞,也有利於孔dna等大分子進入。同時dna在電場中形成的極性對於它運輸進細胞也是非常重要的。
2樓:科學普及交流
主要是為了控制反應條件。
保持溫度在0℃以下。
大腸桿菌感受態細胞轉化實驗中沒冰浴就熱擊會怎樣?
3樓:冰鋒
冰浴是為了質粒附著在菌體表面,熱擊是開啟通道讓質粒進入,覺得lz的做法影響不大,不過要實際驗證
質粒轉化的陽性和陰性對照是什麼,生物實驗中的陽性對照組和陰性對照組分別是什麼有什
陽性對照 確定連線產物已經轉化到感受態細胞中 將感受態細胞進行鋪板陰性對照 僅僅將感受態細胞進行鋪板 這麼做的目的是 如果最後陰性對照的盤子都有菌落生長了,那這批結果必然不可信 如果陽性對照長而目的盤子沒長,那就說明是轉化手法出了問題如果陽性對照都沒長,那就說明這批感受態細胞有問題 陽性對照 用質粒...
轉化實驗中,熱激完成後,感受態細胞為什麼要繼續冰上放置5分
化轉時,感受態細胞膜由於吸附陽離子 ca2 等 呈液晶狀態,受到熱激後,細胞膜出現裂隙,外源dna進入細胞,此時細胞非常脆弱,將其冰浴冷卻,細胞膜修復閉合,進行下一步的復甦時細胞存活率將提高.感受態細胞轉化時,熱擊後需冷卻5分鐘的原因或者好處是什麼及原理?化轉時,感受態細胞膜由於吸附陽離子 ca2 ...
做果蠅實驗時為什麼要作證,反交,為什麼要做正反交的實驗呢??????
證明控制果蠅性狀的基因在性染色體上,而不是在常染色體上 證明控制果蠅性狀的基因在性染色體上 為什麼要做正反交的實驗呢?看看母性遺傳 正交反交結果不同證明控制該性狀的基因是細胞質基因,或控制該形狀的基因在性染色體上或在某些植物中果皮上也有該現象體現。當突變基因是細胞質基因時,由於受精時受精卵的細胞質絕...