1樓:冰雪陽光久久
細胞總蛋白的提取.pdf (110.27k)非常感謝!
總蛋白提取最簡單的方法就是裂解液直接裂解細胞(或加入超聲)裂解液配方呢?誰能提供?我查到的好象是分開提的配方thh_hn wrote:
我預提取細胞株總蛋白,查閱相關資料顯示有胞漿蛋白和膜蛋白的提取方法,請問哪位大俠能告訴我,胞漿蛋白就是總蛋白嗎?或者胞漿蛋白和膜蛋白才統稱為總蛋白?
胞漿是指cytosol,嚴格的講,是指細胞質(cytopla**)除去細胞器的部分,因此不僅不包括核與細胞膜,而且不包括線粒體、內質網等細胞器
不過這是針對細胞學說的,對於生化研究習慣上把細胞質除去核的部分叫做胞漿,公司賣的cytosol protein kit也是隻把細胞核去掉而已。
如何證明所提蛋白為核蛋白或細胞漿蛋白
2樓:匿名使用者
免疫組化中,所染色的蛋白的位置與該蛋白的特性有關係。在現有所研究的蛋白中,不少蛋白存在核轉位的情況, 也就是說當細胞培養的環境或者刺激的因素不同,該蛋白會出現從胞漿到細胞核的表達位置的改變。有時候表達不變僅僅是從胞漿轉位到細胞核,有時候還伴有表達的上調,比如nf-kb。
ripa裂解液對核蛋白的提取好點。加到細胞培養皿裡面,搖15分鐘,然後刮下來吸出來,是做western的話加loading buffer 再95°煮10分鐘。
裂解液裂解是一種比較溫和的紅細胞去除方法,主要用於經酶消化分散的組織細胞的分離純化,淋巴細胞的分離純化以及組織細胞蛋白與核酸提取等實驗中紅細胞的去除。經紅細胞裂解液裂解得到的組織細胞中不含紅細胞,可進一步用於原代培養、細胞融合、流式細胞分析、核酸與蛋白的分離和提取等。
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