1樓：
一般來說液相色譜法流速用的比較多。無論流速高低，都是幾點：
乙個保證色譜峰出峰情況良好，峰型什麼的。這個引數看拖尾因子、理論板數什麼的，其實目測就可以。
乙個是保證分離。主峰前後色譜峰的分離度均大於，最好達到基線分離。
再有乙個就是控制成本，流動相和執行時間什麼的。比如一針要跑乙個小時，就可以適當調整，減少進樣時間。
最後當然還有你色譜柱柱壓的耐受情況。比如柱子的壓力已經是20mpa了，那麼不可能再加大流速了。
這些情況要綜合考慮，適當調整。不過其他條件都相同的情況下，流速較高的時候，色譜峰的峰型比較好看。而且反相色譜法大多數都使用含有緩衝鹽的水相，鹽相在流速太低的情況下會析出。
所以最好不要低於的流速。
如何用高效液相色譜鑑定脂肪酸組成的
2樓：伊森弓長
高效液相色譜是鑑定成分通常需要標準物質進行對照，如果你的脂肪酸組成沒有標準品對照，那麼它是無法進行鑑別的，畢竟誰也不知道出來的譜圖裡的那些峰是什麼玩意，只有用標準進行對比才會知道這個保留時間出來的是什麼，那個保留時間出來的是什麼。所以鑑定的前提是，你得有標準品，然而你不一定能得到所有的脂肪酸標準品，所以用液相的功能還是沒那麼強大的。
為什麼一些液相色譜,氣相色譜分析法要進行衍生化學反應
3樓：精品教輔
不進行衍生化學反應，樣品測不出來。
比如說，柱前衍生測定氨基酸。因為氨基酸既沒有紫外吸收，也沒有螢光發射。所以液相是測不出來的。
衍生化學反應就是加入衍生試劑，然後讓樣品和衍生試劑反應，生成液相可以檢測出來的物質。然後在進行分析。
當然，如果能直接進樣測定出來的樣品就不需要衍生了。
氣相色譜分析和液相色譜分析的基本過程：
分析準備：（液相）配置流動相，沖洗系統，安裝色譜柱，平衡色譜柱，（氣相）安裝色譜柱，開啟氣體和儀器，平衡色譜柱；（樣品和標準）樣品準備，液相要過濾。
進樣分析：呼叫或方法，進樣（只要進樣器洗乾淨，順序沒有關係的）。
資料分析和結果計算：呼叫或方法，處理資料（或手動處理），呼叫或報告並列印等。
清潔和關閉系統：沖洗色譜柱，拆除色譜柱，沖洗系統，關閉系統，關閉氣體（氣相）。
以上有些步驟不一要做的，或者有一些必要的步驟沒有列出來，實際操作根據實際情況來選擇操作過程。
4樓：千葉雅之
簡單地說：不進行衍生化，樣品測不出來呀！
比如說，柱前衍生測定氨基酸。因為氨基酸既沒有紫外吸收，也沒有螢光發射。所以液相是測不出來的。
衍生化就是加入衍生試劑，然後讓樣品和衍生試劑反應，生成液相可以檢測出來的物質。然後在進行分析。
當然，如果你能直接進樣測定出來的樣品就不需要衍生了。
高效液相色譜儀的分離度為什麼要大於1.
5樓：網友
分離度達到可以認為兩個成分完全分離，不會互相干擾。
柱前衍生化反相高效液相色譜法是什麼意思
6樓：千葉雅之
其實就是高效液相色譜，不過在進樣的時候多了一道衍生程式。
簡單地說，尋常的高效液相色譜法是進樣針吸取樣品20ul，注入液相色譜儀，記錄色譜圖。
柱前衍生程式是吸取樣品5ul，衍生試劑15ul，混合20次，然後將混合後的樣品注入液相色譜儀。其實只是進樣程式稍微複雜了一些而已。
所謂的衍生，是在樣品中加入了具有活性的衍生試劑。而柱前衍生指的是在進入色譜柱前進行這一系列的衍生程式。
用氣液色譜法測定脂肪酸可選用什麼方法進行衍生化?
7樓：網友
用瞬時甲基化氣液色譜法測定腦組織中游離脂肪酸莫谷強，張曉敏，魯佑瑜，秦震（上海醫科大學藥學院儀器分析中心實驗室，藥學研究所華山醫院神經病學研究所提要用瞬時甲基化氣液色譜法（glc）分離和測定腦組織中存在遊離脂肪酸（ffa，包括棕櫚酸c16：0、油酸c18：1、硬脂酸c18：
0、花生四烯酸c20：4、廿二碳六烯酸c22：6）。
最低檢測限為0．028～0．045nmol，用十五烷酸c15：0作內標，測得5種標準脂肪酸的線性範圍為0．11～1．74nmol，相關係數r＝0．9992～0．9999，方法**率為95．36％～98．77％，天內精密度rsd＜5．60％；天間精密度rsd＜5．79％。關鍵詞瞬時甲基化，氣液色譜法，遊離脂肪酸正常組織中ffa的濃度很低，但在不同的病理生理條件下顯著地增加，如腦區域性缺血、前列腺炎、白血病及其他疾病方面［1，2］，花生四烯酸起著重要的預示作用。
又如胎兒肺成熟與否，可通過測定羊膜水中的棕櫚酸含量來判斷［8］。因此研究ffa的定量分析方法，測定ffa有助於提供ffa在生理學、病理學方面的精確資料。方法與結果儀器氣相色譜儀。
8樓：網友
可以用鹽酸甲醇的方法甲酯化，適合做油中的脂肪酸組成（37種歸一化），用乙醯氯衍生奶粉之類的物質。
9樓：網友
用鹽酸甲醇的方法來甲酯化，然後靜置抽取上層液體打入毛細管。
最近在在做柱前衍生超高效液相色譜分離20種氨基酸，但亮氨酸與異亮氨酸老分不開，希望大家給點建議，謝謝
10樓：千葉雅之
如果是兩個氨基酸的保留時間距離太近，那麼只能調整液相條件了。比如調整流動相比例，或者是梯度比例，把兩個氨基酸拉開。
也可以適當調整衍生程式。雖然衍生程式不會對氨基酸的保留時間有影響，不過會對它的訊號產生影響。如果這兩種氨基酸的峰高有所下降，或許分離度也可以達到要求。
還有就是注意峰型。衍生化程式很容易損壞色譜柱，超高效色譜的壓力又高，色譜柱很容易損毀。如果峰型不好，建議用純乙腈低流速反衝色譜柱。或者是更換新色譜柱。
11樓：網友
買美國沃特世的液相色譜儀檢測效果會好一點，我的**是，有什麼不清楚的地方可隨時聯絡我，希望我能帶給您一點幫助。
12樓：匿名使用者
題幹不詳，無法解答。
高效液相色譜分離度不好該怎樣處理?
13樓：網友
1、減少有機相比例（反相色譜，正相色譜增大有機相比例），流速不會影響分離度。
2、更換色譜柱。
3、關掉柱溫箱，增大柱溫只能減小分離度。
4，減小進樣量。
14樓：鵂鶹
1、流動相選擇配比調整一下。
2、如果有柱溫箱的話，用柱溫箱加熱試試。
3、以前分離的好不好，如果好現在不好，色譜柱問題比較大，換根色譜柱！
15樓：網友
最好看看買的hplc是否效能可靠。
16樓：網友
1.調整流動相的比例或者成分。
2.適當的降低流速或者降低柱溫。
3.換跟廠家的柱子試試，不同廠家的柱子效能差很多的。
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